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马胚胎移植及卵母细胞胞质内精子注射技术在国外均已取得突破性进展,我国为养马大国,肉马、乳马和赛马业市场虽然广阔,但良种马数量缺口很大,利用新繁殖技术如胚胎移植、体外受精是解决马繁殖率低和加速品种改良的有效途径。本试验从屠宰场采集马卵巢,系统研究妊娠和空怀卵巢,以及不同卵巢状态对卵巢重量、形态和卵泡分布的影响。用采集到的卵母细胞为材料,评估卵丘形态(松散型或致密型)、成熟培养体系(TCM199或NCSU23)、体外成熟时间(34h或38h)以及离子霉素结合6-DMAP激活对马卵母细胞胞质内精子注射(ICSI)后体外发育能力的影响。本试验还对妊娠后期(7月～9月)马卵巢黄体的超微结构进行了研究。非繁殖季节马卵巢形态及卵泡分布的研究结果表明:(1)妊娠和空怀马卵巢的重量和形态,以及大、中、小卵泡数均无显著差异(P>0.05);(2)卵巢状态对马卵巢重量无显著影响(P>0.05);(3)有1个大卵泡的马卵巢的中卵泡数显著高于无大卵泡卵巢(P<0.05)。大卵泡数与小卵泡数呈负线性相关(r=-0.255,P=0.000);(4)马非繁殖季节有20mm以上大卵泡的卵巢占所有卵巢数的19.02%,平均每个卵巢共有4.65个卵泡,大、中、小卵泡分别占卵巢总卵泡数的9.00%、24.18%和66.82%。马妊娠后期黄体组织超微结构的研究结果表明:(1)大黄体细胞呈群状或索状分布,细胞多呈圆形或椭圆形,体积较大。小黄体细胞呈梭形或多边形,体积小;(2)细胞间质存在丰富的胶原纤维。可观察到部分分泌颗粒,脂滴较多,线粒体、内质网、溶酶体较少;(3)黄体细胞质内多数细胞器崩解,黄体细胞呈现明显的退化,孕激素水平的维持不再依靠黄体;(4)在3000×的五个视野内,LLC占黄体细胞的26.06%,SLC占黄体细胞的73.94%;(5)LLC的细胞长径平均为6.45μm,短径平均为3.29μm,SLC的细胞长径平均为3.67μm,短径平均为1.67μm;(6)LLC的核长径平均为5.06μm,核短径平均为2.64μm,SLC的核长径平均为3.51μm,核短径平均为1.59μm。马卵母细胞ICSI后体外发育能力的研究结果表明:(1)马松散型卵母细胞成熟率显著高于致密型卵母细胞(P<0.05,分别为61.09%和41.24%),但ICSI后36h分裂率无显著差异(P>0.05,分别为47.34%和44.92%);(2)两种培养体系对马松散型或致密型卵母细胞成熟率以及ICSI后36h分裂率无显著影响(P>0.05),但相同成熟体系培养松散型卵母细胞成熟率均显著高于致密型卵母细胞(P<0.05),然而ICSI后36h分裂率差异不显著(P>0.05);(3)卵母细胞38h成熟率显著高于34h成熟率(P<0.05),分别为44.43%～68.87%和34.52%～58.90%),松散型卵母细胞在TCM199体系中成熟34h进行ICSI后36h分裂率显著高于松散型或致密型卵母细胞在NCSU23体系中成熟38h后进行ICSI的分裂率(P<0.05);(4)ICSI后用离子霉素结合6-DMAP激活对马卵母细胞ICSI后36h分裂无显著影响(P>0.05)。