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肿瘤光疗,包括光动力疗法(PDT)和光热疗法,具有微创、毒副作用小、无耐药性等优点而倍受研究者关注。尤其是近红外光(Near-infrared light,NIR)介导的光疗由于其较高的组织穿透深度,疗效更佳。PDT重要的作用靶点是线粒体,定位于线粒体的光敏剂具有更显著的抗肿瘤活性。光疗还可以引发病灶的局部炎症反应和长期免疫响应,然而,单一光疗引起肿瘤免疫治疗效果并不显著;免疫佐剂CpG-ODN的辅助可进一步增强抗肿瘤免疫响应,在联合治疗方面具有重要的研究价值。当前,结合纳米载体构建靶向性的多功能纳米复合药物用于肿瘤光疗和免疫联合治疗,正成为肿瘤高效治疗的策略之一。本课题旨在构建一种NIR光响应的基于纳米石墨烯的光敏免疫复合物,用于肿瘤高效联合治疗。通过疏水作用将磷脂酰乙醇胺-氨基聚乙二醇(DSPE-PEG-NH2)-(5-羧基戊基)三苯基溴化磷(TPP)线粒体靶向共聚物结合到纳米氧化石墨烯表面得到GT载体,热重分析结果得出DSPE-PEG-TPP重量比为34%;通过迈克尔加成反应合成DSPE-PEG-CpG共聚物,并负载到GT表面,进一步通过π-π堆积方式负载光敏剂新吲哚菁绿(IR820),得到线粒体靶向的光致免疫复合物GT/DP-CpG/IR820(CpG最大载药率为12%,IR820最大载药率30%);GT/DP-CpG/IR820具有良好的生物相容性、较高的单线态氧产率和光热效应。体外实验结果表明,GT/DP-CpG/IR820能将光敏药物高效输送到小鼠乳腺癌细胞EMT6的线粒体内,在808 nm激光照射下,GT/DP-CpG/IR820的体外光疗效率明显高于非靶向性的GP/DP-CpG/IR820复合物,其产生的单线态氧对亚细胞器线粒体具有显著增强的破坏作用。同时,GT/DP-CpG/IR820纳米复合物能有效刺激RAW264.7分泌TNF-α、IL-6、IFN-γ等促炎因子,而对抑炎因子IL-10的分泌无明显影响。活体实验结果表明,与单一光敏复合物GT/DP-CpG或免疫复合物GT/IR820相比,GT/DP-CpG/IR820光敏免疫复合物在NIR激光照射下(808nm,0.5W/cm2,5min)显示出协同增强的肿瘤抑制效果,主要器官组织切片和血常规、肝功、肾功等生化分析结果证明GT/DP-CpG/IR820具有低的毒副作用。本论文研究表明,NIR光响应的线粒体靶向光致免疫复合物GT/DP-CpG/IR820能够实现光动力、光热、免疫三种方式的高效联合抗癌效应,在肿瘤治疗领域具有重要的应用前景。