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研究背景和目的:
晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products，RAGE)基因位于染色体6p21.3，编码400多个氨基酸(牛416，人404)，是一完整的膜蛋白，分子量为35kD。氨基酸系列分析表明，RAGE为免疫球蛋白超家族的新成员。RAGE在体内分布非常广泛，可在多种细胞表面上表达。RAGE的配体有晚期糖基化终产物(advanced glycation end products，AGEs)、β淀粉样蛋白(amyloid-β protein，Aβ)、神经轴突生长因子、S100/钙粒蛋白及甲状腺运载蛋白等。越来越多的生物学证据表明，RAGE可以通过独特机制启动或加速动脉粥样硬化损伤。
RAGE基因启动区存在-374T/A多态性；-374T/A的置换阻断了一系列CTF/NF1转录因子对RAGE基因启动区的结合，对其转录活性产生明显的影响。国外有关RAGE基因-374T/A多态性与冠心病关系研究的结论不甚一致，部分研究认为AA基因型冠心病患者病变的血管支数明显少于TA基因型和TT基因型患者，认为A/A基因型对糖尿病和正常血糖CAD患者的心血管病变起着保护作用；但亦有作者的研究发现，在糖尿病及正常血糖患者中RAGE基因-374T/A多态性不是冠心病的危险因素。另外，也有研究发现AGEs通过RAGE-ERK1/2 MAPK途径诱导糜蛋白酶的表达，进而导致糜蛋白酶依赖的血管紧张素Ⅱ的生成，提示RAGE可能在高血压的发病过程中起着重要的作用。
本研究拟通过对RAGE基因启动区-374T/A多态性的研究，观察RAGE基因启动区-374T/A多态在中国汉族冠心病人群和对照组人群中的分布特点，并比较两者之间的差异，分析RAGE基因启动区-374T/A多态性与冠心病及原发性高血压的相关性。
研究对象与方法:
1.研究对象
1.1病例组：入选标准：①冠状动脉造影证实任何一支血管内径最狭窄≥50﹪；②急性心肌梗死；③陈旧性心肌梗死。共有127例，其中男性79例，女性48例，平均年龄(岁)65.24±11.34。
1.2对照组：入选标准：①冠状动脉造影证实无冠状动脉狭窄；②无冠心病相关的临床症状；ECG、运动平板试验、LJCG均正常的其他疾病住院患者或健康体检者。共有88例，其中男性44例，女性44例，平均年龄(岁)62.67±10.01。
1.3亚组研究
1、糖尿病诊断以1999年WHO的糖尿病诊断标准，或既往明确诊断为2型糖尿病，正在应用口服降糖药物或接受胰岛素治疗者。剔除糖尿病患者，分为非糖尿病冠心病组和非糖尿病对照组。
2、以冠心病发生时男性55岁，女性65岁为界，划分为早发冠心病组和晚发冠心病组。
3、按病变累及左前降支、左回旋支、右冠状动脉的支数(显著累及左主干计为两支)，分为1支病变组、2支病变组和3支病变组。
4、根据2004年中国高血压防治指南的诊断标准，排除继发性高血压，分为原发性高血压组和正常血.压绢。
2.研究方法
2.1收集外周静脉血标本(EDTA抗凝)，离心分离血浆和全血细胞，均存放于-20℃冰箱内保存。
2.2临床相关资料的采集与判断
(1)年龄：按身份证记录的实足年龄计。
(2)血压的测量及原发性高血压的诊断标准：应用台式水银血压计，测量卧位上肢血压，以Korotokoff法第一音和第五音定义为收缩压和舒张压。
(3)吸烟史：平均每日吸烟≥1支，且近一年内有吸烟者记为吸烟史阳性。
(4)血浆TC、LDL-C、HDL-C、TG水平：采用日本HATACHI-7600全自动生化分析仪进行测定。以患者住院过程中首次生化报告结果为准，记录TC、LDL-C、HDL-C、TG数值。
2.3全血基因组DNA提取：使用血细胞基因组纯化试剂盒(Takara)提取基因组DNA。
2.4统计处理计算多态性基因型频率，确认符合Hardy-Weinberg平衡，计算等位基因频率。计量资料以x±S表示，比较采用t检验和Fishers exact test，计数资料比较采用x<2>检验，两组间基因型频率及等位基因频率分布比较采用x<2>检验。基因型与冠心病、原发性高血压的相关性比较，采用单因素logistic回归分析。全部数据用SAS 8.1统计分析软件处理。
结果:
1.Hardy-Weinberg平衡冠心病组与对照组的RAGE基因-374T/A多态性进行Hardy-Weinberg平衡检验，结果p=0.134232。说明群体基因遗传平衡来自同一孟德尔群体。
2.冠心病组与对照组的RAGE基因-374T/A多态性等位基因频率和基因型频率两组的男女比例、年龄构成、糖尿病患病率均未见明显差异(p>0.05)。冠心病组高血压患病率和吸烟比例均明显高于对照组，差异有统计学意义。两组均可见TT、TA和AA基因型。两组RAGE基因-374T/A多态性等位基因频率和基因型频率差异均无统计学意义(p=0.9160和p=0.9927)。单因素logistic回归分析提示，AA基因型与冠心病无关联(OR=0.921，95﹪CI[0.201，4.220]，p=0.9155)。
3.非糖尿病冠心病组与非糖尿病对照组RAGE基因-374T/A多态性等位基因频率和基因型频率两组的男女构成、年龄和吸烟人数差异均无统计学意义(p>0.05)，而非糖尿病冠心病组的高血压患病率明显多于非糖尿病对照组(p=0.0182)。两组均可见TT、TA、AA基因型，但两组RAGE基因-374T/A多态性等位基因频率和基因型频率的差异均无统计学意义(p=0.5828和p=0.3084)。单因素logistic回归分析提示，AA基因型与非糖尿病冠心病无关联(OR=1.415，95﹪CI[0.253，7.926]，p=0.6929)。
4.早发冠心病组与晚发冠心病组RAGE基因-374T/A多态性等位基因频率和基因型频率两组的男女构成、糖尿病患者比例、吸烟人数均无明显差异。但早发冠心病组中高血压患者明显少于晚发冠心病组，差异有统计学意义(p=0.0005)。两组的血脂水平大致相等，无明显差异。两组均可见TT、TA、AA基因型，但RAGE基因-374T/A多态性等位基因频率和基因型频率差异均无统计学意义(p>0.05)。
5.不同冠状动脉病变程度的RAGE基因-374T/A多态性等位基因频率和基因型频率根据主要冠脉(左主干、前降支、回旋支、右冠状动脉，左主干计为2支血管病变)狭窄≥50﹪，分为1支病变组、2支病变组和3支病变组。基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡(p=0.242383)。三组均可见TT、TA、AA基因型，但与3支病变组比较，其基因型频率和等位基因频率差异均无统计学意义(p>0.05)
6.原发性高血压组与正常血压组的RAGE基因-374T/A多态性等位基因频率和基因型频率。原发性高血压组与正常血压组的男女构成、吸烟患者比例、血脂水平均无明显差异(p>0.05)。原发性高血压组的年龄大于正常血压组，差异有统计学意义(p<0.0001)。另外，原发性高血压组糖尿病患病率亦明显多于正常血压组，差异有统计学意义(p=0.0218)。两组均可见TT、TA、AA基因型，符合Hardy-Weinberg平衡，p=0.134。但两组间的T/A等位基因频率和基因型频率的差异均无统计学意义。单因素logistic回归分析提示，AA基因型与原发性高血压无关联(OR=5.14，95﹪CI[0.608，43.434]，p=0.1327)。
7.根据是否患有冠心病，分别在原发性高血压组和正常血压组中分为冠心病组与对照组。在原发性高血压组的分组中，冠心病组患者的年龄大于对照组患者，差异有统计学意义(p=0.001)。而吸烟人数、糖尿病患病率、血脂水平均无明显的差异。在正常血压组的分组中，冠心病组的患者吸烟人数明显多于对照组，差异具有统计学意义(p=0.0046)。无论是原发性高血压组还是正常血压组中的冠心病组和对照组，都可见TT、TA、AA基因型。但原发性高血压组中的冠心病组与对照组间和正常血压组中的冠心病组与对照组间，RAGE基因-374T/A多态性等位基因频率和基因型频率的差异均无统计学意义(p>0.05)。
结论:
1、RAGE基因启动-374T/A多态性可能与中国汉族人冠心病、非糖尿病冠心病的易感性无关联；
2、RAGE基因启动-374A/A基因型可能不是中国汉族人早发冠心病的保护因素；
3、RAGE基因启动区-374T/A多态性可能与中国汉族人冠状动脉病变程度无关联；
4、RAGE基因启动区-374T/A多态性可能与中国汉族人的原发性高血压易感性无关联。