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目的： 创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury TBI)是一种严重的脑组织损伤，有很高的致死率及致残率。在脑损伤的致伤机制中，继发性脑损伤占有很重要的角色，它的严重程度决定了患者的预后。大量实验研究证实，细胞凋亡(apoptosis)是继发性脑损伤重要的细胞死亡形式。醒脑静注射液主要成分有麝香、冰片、栀子、郁金等，是一种中药复方制剂，近年来，醒脑静注射液逐渐开始用于颅脑外伤的治疗，并取得了一定的疗效。本试验的目的是观察醒脑静注射液对大鼠创伤性脑损伤(TBI)后细胞凋亡及Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的影响，探讨醒脑静对脑外伤后细胞凋亡的影响和可能机制，为临床治疗脑损伤提供理论依据。 方法： 普通级Wistar雄性大鼠108只，体重300-350g，由湖北省实验动物中心提供。随机将动物分为假手术组、损伤对照组和醒脑静注射液治疗组，每组36只，每组再分为伤后6h、12h、24h、48h、72h和168h6个亚组，每亚组6只。假手术组仅行开颅术，另两组采用改进的Feeney法制作大鼠TBI模型，醒脑静注射液治疗组在伤后10min内腹腔内注射醒脑静注射液20ml／kg，每日一次至造模结束；损伤对照组则腹腔内注射等量的0.9％氯化钠溶液。然后分别按各时间点将动物断头处死，立即取出全脑组织，置于4％的中性甲醛溶液中固定备用。组织切片为常规石蜡切片。应用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated biotin-dUTP nick end labeling，TUNEL)检测细胞凋亡，采用过氧化物酶标记的链霉卵白素(Streptavidin／Peroxidase，SP)法进行Bcl-2、Bax、caspase-3的免疫组织化学染色，检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达。在400高倍光学显微镜下观察TUNEL及Bcl-2、Bax、caspase-3免疫反应的结果，计算每张标本随机5个视野的平均阳性细胞数。 结果： 免疫组化检测见Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白阳性表达主要在胞浆和核膜着色，呈弥漫性或散在性棕黄色颗粒。Bcl-2蛋白表达在伤后6h下降，在损伤后72h表达值达到最低。而治疗组Bcl-2蛋白表达下降在各个时间点无显著变化，24h后两组比较有统计学意义(P＜0.01)。Bax蛋白表达在伤后6h增强，48～72h达高峰，伤后7d明显下降，治疗组的蛋白表达较损伤组降低，72h以后两组比较有统计学意义(P＜0.01)。Caspase-3蛋白表达在伤后6小时可见，24h后表达增加，3d达高峰，治疗组蛋白表达降低，1d后两组比较有统计学意义(P＜0.05)。TUNEL阳性细胞表达在细胞核上，呈棕黄色颗粒，正常脑组织内有很少的TUNEL阳性细胞表达，伤后6小时表达开始增加，72小时达到高峰。治疗组阳性细胞较损伤组减少，48h后两组比较有统计学意义(P＜0.05)。 结论： 从研究中发现，醒脑静注射液对凋亡具有抑制作用，作用从损伤后24h开始，72h以后逐渐达到高峰。关于醒脑静注射液防治脑损伤导致的脑神经细胞凋亡的作用机制，分析认为与这种药物具有显著的清除自由基及拮抗细胞因子的作用有关。氧自由基与兴奋性氨基酸在颅脑外伤后的过度释放可导致神经细胞钙通道开放，细胞内钙离子大量积聚，引起钙超载，而氧自由基和钙超载正是导致细