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目的:体外培养SACC细胞株ACC-M、ACC-2,对比其侵袭、迁移能力的差别并检测HMGB1、TLR4、TLR9三种因子在这两种细胞株中基因和蛋白水平表达情况,比较这三种因子在SACC细胞株ACC-M、ACC-2中表达的差异。
方法:1.相同细胞密度下接种Transwell小室24小时后计数ACC-M、ACC-2两种细胞株穿过微孔膜数量,比较其侵袭迁移情况;2.实时荧光定量PCR检测HMGB1、TLR4、TLR9 mRNA相对表达量,比较它们在两种细胞株中的差异;3.免疫印迹法Western bloting从蛋白质的水平上进一步观察比较三种因子在不同细胞株中的表达情况。
结果:1.小室结果显示高转移细胞株的侵袭和迁移细胞数量均多于低转移细胞株(P<0.001);2.与ACC-2相比,ACC-M的HMGB1、TLR4、TLR9mRNA的相对表达量要高,且具有统计学意义(P<0.05);3.Westrn bloting结果显示,细胞株ACC-M的三种因子的蛋白含量均高于ACC-2(P<0.05),但TLR4、TLR9尤其是后者的含量不高。
结论:1.SACC的高转移细胞株ACC-M的侵袭迁移能力要高于低转移细胞株ACC-2;2.HMGB1在ACC-M、ACC-2细胞株中有明显的表达,提示在ACC的侵袭迁移中起着一定作用;3.TLR4作为HMGB1配体之一在SACC的侵袭转移过程中发挥一定作用,但表达量不高,可能还有其他配体起作用;4.TLR9在SACC-M中表达量较少,在SACC-2及其微量,提示在SACC的侵袭转移过程的作用及其有限。