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目的:研究转录因子T-bet、GATA-3及相关信号通路在慢性再生障碍性贫血(CAA)免疫发病中的作用，从Th细胞失衡、转录因子及相关信号通路水平探讨生血合剂治疗CAA的免疫调控机理，并分析其与CAA不同中医证型的关系，从新的角度研究CAA不同证型的物质基础。
方法:将62例CAA患者分为治疗组32例和对照组30例，治疗组患者辨证分为脾肾阳虚型(9例)和脾肾阴虚型(23例)，脾肾阳虚型患者服用生血合剂1号，脾肾阴虚型患者服用生血合剂2号，对照组服用环孢菌素A(CsA)，两组均同时配合支持治疗，治疗6月后，进行疗效观察；采用实时荧光定量PCR(RealtimeFQ-PCR)检测CAA患者治疗前后外周血单个核细胞(PBMNC)T-bet、GATA-3及STAT4、STAT6 mRNA表达，采用流式细胞术、酶联免疫吸附法(ELISA)检测CAA患者治疗前后外周血Th1、Th2比例及PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12、IL-4水平；分离培养CAA患者外周血单个核细胞，分为再障组、生血合剂大剂量组、生血合剂小剂量组和环孢素组，分别检测培养后单个核细胞转录因子、信号分子mRNA表达及培养上清细胞因子分泌水平。
结果:(1)治疗组、对照组在临床疗效、外周血象/骨髓象改善方面比较无明显差异(P>0.05)，但治疗组在中医证候改善方面明显优于对照组(P<0.05)，且生血合剂发生不良反应也明显少于CsA。脾肾阳虚型患者在临床疗效、血象改善方面优于脾肾阴虚型(P<0.05)。(2)CAA患者PBMNC T-bet、STAT4 mRNA表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、Th1/Th2比值、PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12表达均明显高于正常组(P<0.01)，采用生血合剂或CsA治疗后，患者T-bet、STAT4表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ、IL-12表达有所下降，但T-bet、STAT4、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ表达仍未达到正常水平，治疗组和对照组之间比较无明显差异(P>0.05)，而GATA-3、STAT6 mRNA表达、Th2比例、IL-4表达在治疗前后与正常人比较均无明显差异(P>0.05)。(3)脾肾阴虚型患者PBMNC T-bet、STAT4表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、PBMNC上清IFN-γ、IL-12均高于脾肾阳虚型(P<0.05)，而GATA-3、STAT6表达、Th2比例、Th1/ Th2比值、IL-4比较则无明显差异(P>0.05)。(4)PBMNC体外培养后，再障组T-bet、STAT4、IFN-γ、IL-12表达均明显高于生血合剂小剂量组、生血合剂大剂量组和环孢素组(P<0.05)，生血合剂小剂量组T-bet、STAT4、IFN-γ、IL-12显著高于生血合剂大剂量组、环孢素组(P<0.05)，生血合剂大剂量组T-bet、STAT4、IFN-γ、IL-12与环孢素组之间没有显著性差异(P>0.05)；各组GATA-3、STAT6、IL-4之间比较无明显差异(P>0.05)。
结论:
(1)生血合剂治疗CAA疗效与CsA相似，但在中医证候改善方面，生血合剂则明显优于CsA，且生血合剂治疗未见明显毒副反应。
(2)IFN-γ/T-bet、IL-12/ STAT4通路的异常活化，及Th平衡向Th1型偏移，在AA免疫异常的发病过程中起到关键的作用。
(3)生血合剂和CsA能通过下调IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化，并纠正Th1过度极化，从而减轻AA异常亢进的细胞免疫，解除造血抑制。
(4)与脾肾阳虚型患者相比，CAA脾肾阴虚型存在更严重的IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路异常活化和Th1偏移，后者存在更明显的免疫异常状态，这可能是CAA不同证型的客观物质基础。
(5)CAA脾肾阳虚型治疗效果优于脾肾阴虚型，提示CAA“阳虚易治，阴虚难调”。