论文部分内容阅读
目的:探讨铀矿尘作用小鼠巨噬细胞不同时间后的细胞毒性作用及铀矿尘诱导巨噬细胞表达TGF-β1的影响。方法:采用小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞株,进行体外细胞培养实验,实验分别设铀矿尘实验组和无粉尘培养基对照组。实验组用120μg/ml的铀矿尘混悬液与RAW264.7细胞分别作用2、4、8、16、24、32h后,通过MTT实验、HE染色、AO/EB染色等方法观察铀矿尘对RAW264.7增殖活性、细胞形态及细胞凋亡的影响;利用比色法测定细胞培养上清液中·OH、H2O2及MDA水平的变化;应用ELISA法测定铀矿尘对RAW264.7细胞培养上清液中TGF-β1水平的影响。结果:铀矿尘混悬液作用RAW264.7细胞2、4、8、16、24、32h后,MTT实验结果显示,RAW264.7细胞增殖活性明显降低(与对照组比较,P<0.05),并且随着染尘时间的延长,RAW264.7细胞的存活率逐渐降低;HE染色可见,随着染尘时间的延长,铀矿尘组梭型或不规则型细胞数目上升,多核细胞数明显增加,细胞胞质缺失,胞核外露、染色变浅,细胞形态变化较大;AO/EB染色发现,铀矿尘组红色或橙色的凋亡/坏死细胞明显增多,并且随着染尘时间的延长,坏死和凋亡细胞数目逐渐增加;比色法测定细胞培养上清液中·OH、H2O2及MDA含量发现,铀矿尘组细胞培养上清液中·OH、H2O2、MDA水平明显升高(与对照组比较,P<0.05),并且随着染尘时间的延长,其水平持续升高;ELISA实验结果显示,铀矿尘能够引起RAW264.7细胞培养上清液中TGF-β1水平增高(与对照组比较,P<0.05),而且随着染尘时间的延长,TGF-β1水平逐渐增高,在24h时达到峰值。结论:1、铀矿尘能够引起巨噬细胞凋亡或崩解,抑制细胞增殖活性。2、铀矿尘可以引起细胞培养上清液中自由基水平升高,并诱发脂质过氧化反应。3、铀矿尘能够诱导巨噬细胞分泌TGF-β1,引起细胞培养上清液中TGF-β1水平升高。