【摘 要】
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表面等离子共振成像(Surfaceplasmonresonanceimaging,SPRi)作为一种免标记成像技术,能够对传感膜表面附近分子的行为进行静态和动态的分析,尤其适合于高通量分子识别等研究,
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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表面等离子共振成像(Surfaceplasmonresonanceimaging,SPRi)作为一种免标记成像技术,能够对传感膜表面附近分子的行为进行静态和动态的分析,尤其适合于高通量分子识别等研究,正在向生命科学、临床医学、药物筛选及食品检测等领域推进,进展迅速。但其方法与应用发展的前提是要有合适的仪器。目前虽已有不少商品仪器,但却还没有属于我国自主知识产权的仪器,而此时国外的仪器厂商正在努力进入中国市场。本文对此展开了研究,在对现有装置与技术进行分析的基础上,从我国国情出发,确定了研制结构稳固、易于加工、适用性广的SPRi仪器的目标并发展相应应用方法。经过努力,取得了以下成果:
1、研制了两台基于折返耦合棱镜的固定光路式SPRi仪器样机。所研制仪器结构紧凑、调节简便、易于实用。它可进行40-80°的广角度精确调节;装备有1-2X的变焦调节机构,能对(1-4cm2)传感芯片成像,并具有40μm空间分辨率:能对样品进行2-95℃温度控制:以蔗糖溶液为标准测得的灵敏度达到7×10-6RIU,且SPR共振角与折射率呈线性关系,线性相关系数为0.99953,具备定量功能。
2、建立了配套的平整金膜镀制技术以及可寻址芯片制备方法。完善了真空蒸镀金膜的方法;设计并建立了一种基于手动点样、速冻清洗封闭的可寻址微点阵制备方法,解决了仪器应用过程中高通量芯片的制备问题。
3、利用所研制的仪器发展了SPRi及其相关方法。研究了批量蛋白间的相互作用的SPRi分析方法,取得了预期的结果。初步探索了SPRi与等电聚焦、毛细管电泳以及气相色谱等多种分离技术的联用方法,结果显示SPRi具有可用作分离技术免标记检测的潜力。
4、针对SPRi信号放大,建立了纳米银.还原石墨烯复合物(AgNP-rGO)的光化学制备新方法。该法以银氨溶液和氧化石墨烯(GO)为原料,以“一锅煮”形式,经紫外曝光10分钟即得到银粒均匀分散、表面密度在7.2%-81.6%间可调的AgNP-rGO,它还能加速催化NaBH4对邻硝基苯胺的还原反应。
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