论文部分内容阅读
目的: 探讨鞘内注射糖皮质激素对神经病理性疼痛大鼠行为学及其脊髓水平Akt mRNA表达的影响
方法: 132只SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为慢性背根神经节压迫（CCD）组（n=114）和假手术组（n=18），CCD组进一步分成六大组：A组（n=18）、D组（n=18）、C组（n=18）、ET组（n=24）、LT组（n=24）、TT组（n=12）。A组：A4组（制模后3 dAkt抑制剂，4 d取材），A14组（制模后3 d、13 d Akt抑制剂，14 d取材）和A15组（制模后3 d、13 d Akt抑制剂，15 d取材）；D组：D4组（制模后3 d地塞米松，4 d取材），D14组（制模后3 d、13 d 地塞米松，14 d取材）和D15组（制模后3 d、13 d地塞米松，15 d取材）；ET组：(D3V13)14组（制模后3 d地塞米松、13 d 10％DMSO，14 d取材）和(D3V13)15组（制模后3 d地塞米松、13 d 10％DMSO，15 d取材）；(DA3V13)14组（制模后3 d地塞米松和Akt抑制剂、13 d 10％DMSO，14 d取材）和(DA3V13)15组（制模后3 d地塞米松和Akt抑制剂、13 d 10％DMSO，15 d取材）；LT组：(V3D13)14组（制模后3 d 10％DMSO、13 d地塞米松，14 d取材）和(V 3 D 13)15组（制模后3 d 10％DMSO、13 d地塞米松，15 d取材）；(V3DA13)14组（制模后3 d 10％DMSO、13 d地塞米松和Akt抑制剂，14 d取材）和(V 3 D A13)15组（制模后3 d 10％DMSO、13 d地塞米松和Akt抑制剂，15 d取材）；TT组： (D3DA13)14组（制模后3 d 地塞米松、13 d地塞米松和Akt抑制剂，14 d取材）和(D3DA13)15组（制模后3 d 地塞米松、13 d地塞米松和Akt抑制剂，15 d取材）；C组：C4组（制模后3 d10％DMSO，4 d取材），C14组（制模后3 d、13 d 10％DMSO，14 d取材）和C15组（制模后3 d、13 d 10％DMSO，15 d取材）。假手术组进一步分成3组：S4（制模后3 d 10％DMSO，4 d取材），S14组（制模后3 d、13 d 10％DMSO，14 d取材）和S15组（制模后3 d、13 d 10％DMSO，15 d取材）。首先自枕骨大孔处行蛛网膜下腔置管，置入微细导管（PE10）至腰髓平面，5 d后从L4-5椎间孔置入4 mm×4 mm，直径0.7 mm的钢棒，完成CCD模型的制作，假手术组L4-5椎间孔不置入钢棒。于制模前3 d，制膜后3 d、4 d、7 d、10 d、13 d、14 d、15 d检测痛行为学指标：机械痛缩足阈值（PWMT）和热痛缩足潜伏期（PWTL）。按照分组在相应时间点处死大鼠，用Real-time PCR的方法检测脊髓腰膨大及背根节PKB/Akt水平。
结果: （1）CCD组和假手术组大鼠术前痛行为学基础值之间的差别无统计学意义（P＞0.05）；CCD组所有大鼠在制模后1 d都开始出现痛行为学改变，3 d PWMT降低到（2.67±1.03）g，与假手术鼠（11.33±2.94）g相比（P<0.05）；随后1周内出现稍回升的趋势，在第13 d时PWTL（2.33±0.82）。而sham组术后3 d PWTL略降低（P＞0.05），随后逐渐恢复到基础值水平。制膜后3 d PWTL降低到（11.82±1.82）g，与假手术组（22.14±2.34）g相比（P<0.05）；CCD组随后出现少许回升，第10 d至第13 d CCD组PWTL水平进一步下降，至第13 d时（9.22±1.28）s，与假手术组（21.31±0.98）s相比，有统计学意义（P＜0.05）。（2）于第3 d、13 d测痛行为学后鞘内分别给予地塞米松、地塞米松和Akt抑制剂Ⅳ，第4 d、14 d PWMT明显上升，鞘内给予地塞米松和Akt抑制剂Ⅳ后上升的幅度更明显（P＜0.05），具有统计学意义。而LT组鞘内给药后痛行为学无明显改变（P＞0.05），与给药前相比，没有统计学意义。（3）Real-time PCR 结果C组与假手术组术后第3 d Akt mRNA分别是（3.4±0.56）、（1.01±0.02），（P＜0.05），具有统计学意义。制模后第3 d 鞘内给予10％DMSO，第4 d 脊髓水平Akt mRNA表达为（2.66±0.33）。制模后第3 d 鞘内给予地塞米松或地塞米松和Akt抑制剂Ⅳ后，脊髓水平Akt mRNA表达均下降，与术前脊髓水平Akt mRNA表达无统计学意义。术后10 d 后鞘内给予地塞米松或地塞米松和Akt抑制剂Ⅳ，脊髓水平Akt mRNA的表达无统计学意义。
结论: 鞘内注射地塞米松可以有效改善慢性背根神经节压迫引起的痛行为学反应，而地塞米松和Akt抑制剂Ⅳ具有共同协同作用，对改善该疼痛的行为学反应更明显，但具有时间依赖性。