河北省鸡IBDVVP2高变区序列分析及抗原和毒力测定

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以来自河北省13株鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组RNA为模板,用RT-PCR/Nested-PCR的方法,得到了其VP2高变区的cDNA片段,并测定了其核苷酸序列,与本实验室已测定的周边省市及文献已报道的IBDV毒株相应区域进行比较,结果表明:(1)囊毒HeB-bdI,HeB-lf,HeB-qhd,HeB-zjk,HeB-sjz与欧洲超强毒(vvIBDV)DV86、UK661,日本超强毒OKYM,只有1-3个氨基酸的差异,由于这些毒株分别来自河北省不同地区,因此该结果表明,vvIBDV可能已在中国大陆广泛流行。(2)弱毒株HeB-bdx,HeB-cz,HeB-hs,HeB-cd,HeB-bdjz,HeB-hd,HeB-bdv,HeB-xt与欧洲细胞毒株Cul和P2之间具有很高的同源性。而弱毒株HeB-bdx,HeB-cz,HeB-hs,HeB-cd,HeB-bdjz,HeB-hd间同源性极高,高达100%,该结果表明,河北省不同地区的毒株具有交叉感染现象。(4)弱毒株HeB-bdx,HeB-cz,HeB-hs,HeB-cd,HeB-bdjz,HeB-hd与河北省周边地区毒株SD(qd),HeNn,V-SD,V-MB,V-BJ同源性极高,高达100%。超强毒株HeB-bdI,HeB-lf与BJ-1具有很高的同源性。这表明,河北省与其周边省市的法氏囊毒株有交叉感染,相互影响的。(3)虽然有报道认为变异株已在中国出现,但本实验室已分析的中国毒株及河北省毒株与美国变异株的亲缘关系相距都较远。 IBDV A片段5’端重叠的大ORF编码110kD前体蛋白H2N-VPX-VP4—VP3-COOH。后者被加工成VP2、VP3和VP4三种蛋白。随着vvIBDV和变异株的发现,IBDV的抗原变异和毒力研究变的尤为重要。而近几年的研究表明,VP2高变区与IBDV的抗原变异和毒力强弱有密切的关系,为进一步了解强弱毒株毒力和抗原的差别,并进一步证实测序结果的正确性,本试验采用双抗夹心ELISA和AC-ELISA的方法分别对其毒力和抗原进行了测定,并通过动物试验证实了,其结果与序列分析结果基本一致。该结果表明,VP2与IBDV毒株的毒力强弱和抗原变异有密切的关系。这为进一步研究其VP2基因的功能打下了基础。
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