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目的: 1.观察术后疲劳综合征(Postoperative Fatigue Syndrome,POFS)的大鼠海马内炎症因子,腹腔炎症细胞因子以及外周血中炎症因子的动态变化 2.观察在术后疲劳综合征的大鼠体内阻断迷走神经后,海马内炎症因子,腹腔内炎症因子及外周血中炎症因子所发生的变化,以探讨迷走神经在术后疲劳综合征大鼠模型中对炎症因子变化的影响。 方法: 1.实验动物:SPF级SD成年雄性大鼠,体重220-250g,购自上海斯莱克实验动物有限公司。 2.方法及检测指标:将成年雄性SD大鼠称重编号随机分为对照组(C组),POFS模型组(M组),术后疲劳模型基础上的迷走神经切除组(V组);每组再按时间点,分为术后第1天和术后第3天组两个亚组。然后于术后对应的时间点,进行旷场试验后,抽取大鼠血液制备血清,同时提取腹腔灌洗液和大鼠大脑海马体,通过Real-time PCR检测炎症因子IL-6,IL-1β,TNF-α的mRNA表达;ELISA检测血清和腹腔灌洗液中炎症因子IL-6的分泌水平;电镜下观察各组大鼠海马体CA1区超微结构变化。 结果: 1.旷场试验:与对照组C组比较,在术后第1天和第3天,M组的运动得分显著降低(P<0.05);同时,M组的外周与中央格子比、中央起始格子停留时间以及休息时间显著增加(P<0.05)。与M组相比,在术后第1天和第3天,V组的运动得分显著降低(P<0.05),而外周与中央格子比、中央起始格子停留时间以及休息时间明显延长(P<0.01)。此外,与M组相比,在术后第1天,V组的中央起始格子停留时间,外周与中央格子比显著增加(P<0.05) 2.Real-time PCR:与对照组比较,术后第1天和第3天,大鼠海马内各项炎症因子mRNA表达均升高(p<0.05);V组与M组比较,术后第1天和第3天,大鼠海马内各项炎症因子mRNA表达均升高(p<0.05)。 3.ELISA:血清和腹腔灌洗液中的炎症因子IL-6的检测结果为: 术后第1天,对照组、模型组和迷切组的血清中的IL-6分泌水平分别为65.85±10.59pg/mL,85.36±10.35pg/mL和89.65±11.25pg/mL,术后第3天,对照组、模型组和迷切组的血清中的IL-6分泌水平分别为56.73±14.38pg/mL,88.96±11.59pg/mL和96.86±14.57pg/mL。 术后第1天,对照组、模型组和迷切组的腹腔灌洗液中IL-6分泌水平分别为70.55±3.59pg/mL、75.18±11.24pg/mL和75.29±13.26pg/mL。术后第3天,对照组、模型组和迷切组的腹腔灌洗液中的IL-6分泌水平分别为69.35±4.52pg/mL、79.58±13.27pg/mL和195.26±11.68pg/mL。 4.电镜:电镜下观察三组大鼠海马神经元的超微结构。模型组海马神经元在术后呈退化状态,核膜不光滑,呈波浪形状,染色质在核膜附近聚集。对照组海马神经元细胞核圆,里面的染色质均匀分布,并且可以观察到很多正常的内质网、核糖体、线粒体等细胞器。此外,迷走神经切除的V组中海马神经元的结构相对于M组退化更为严重。 结论: 在术后疲劳综合征大鼠中,迷走神经切除后颅内炎症因子升高,炎症反应加重。切除迷走神经不能阻断腹腔炎症向颅内的传递,腹腔内炎症信号通过外周血途径传输至颅内是造成颅内炎症的重要原因。迷走神经在术后疲劳中可能起到重要的抗炎作用。