论文部分内容阅读
1967年由Horvathz首次提出微柱高效液相色谱技术，科技工作者在仪器设备尤其是色谱柱的研究方面做了许多工作并取得了显著的成绩。与此同时，许多分析实例的不断研究和拓展为其理论的研究和发展提供了丰富的实践资料。进入．20世纪末随着分离技术的不断提高，微柱高效液相色谱也得到了长足发展。微柱高效液相色谱具有分析时间短、最佳流量较低、易与其它仪器在线联用、分析样品少、溶剂少、环境污染小等优点，因此，引起了国内外众多学者的关注。目前已经有不少微柱高效液相色谱应用方面的研究报道，主要应用于基因工程药物、蛋白质及多肽的研究中，但该技术在天然产物质量监控方面的应用报道还比较少见。
本论文归纳总结了中药质量控制的重要性以及微柱高校液相色谱的特点及其研究进展，在此基础上，应用微柱高校液相色谱法在天然产物(中草药原药材)活性成分分析及质量控方面进行了一些研究，完成了以下工作：
1.研究了用安捷仑ZORBAX Stable Bound(4.6×50m,1.8μm)快速分离柱高效液相色谱法测定大黄中大黄素，大黄酸和芦荟大黄素的方法，大黄素，大黄酸和芦荟大黄素在2.0 min内可达到基线分离，和常规液相色谱分析相比缩短了80％以上的分析时间。用该方法测定了大黄药材，虎杖药材及其制剂中的大黄葸醌物质。此方法未见文献报道，具有高效、快速、简便和灵敏的特点，用该方法所测的结果与文献报道基本一致，证明该法有作为大黄、虎杖药材及其制剂质量标准控制的应用价值。
2．采用安捷仑ZORBAX SB-C<,18>(1.8×10mm,1.8μm)快速分离柱为固定相，建立了一个溅定虎杖中白藜芦醇的微柱高效液相色谱法方法，白藜芦醇与其它成分在1.0min内可达到基线分离，用该方法测定了10批不同来源的虎杖药材和同一虎杖样品的6个不同部位的白藜芦醇含量。结果证明，和常规液相色谱法相比，该方法简单快速，测定结果准确可靠，有作为快速检测虎杖中白藜芦醇含量的应用前景。
3．通过固相萃取对样品进行脱脂处理后，以0.2％磷酸-甲醇(50:50，V/V)为流动相，流速为1.5 ml/min，安捷仑ZORBAX Stable Bound(4.6×50mm,1.8μm)色谱柱为固定相，建立了一个在2.5分钟内同时分离和测定木芙蓉中懈皮素、山奈酚、芦丁、山奈酚-3-O-β-芸香糖苷的微柱高效液相色谱分离分析新方法，并将此方法用于3批不同产地的中药木芙蓉，以及同一个木芙蓉样品中的三个不同用药部位中四种黄酮类物质的分离分析。结果表明，此方法简单，快速，重现。
4．在优化的色谱条件下，即采用安捷仑的ZORBAX Stable Bound(4.6×50mm,1.8μm)色谱柱为固定相，以乙腈:1％NaHPO<,4>(内含0.1％SDS)=39:61为流动相，流速为2.0mL/min，建立了一个在1.5min内同时分离和测定巴马汀、小檗碱和药根碱的分离分析方法，并将此方法用于7批不同来源的中药大黄藤中三种生物碱的测定，样品的加标回收率符合要求，说明该法可以用于中药大黄藤的质量控制。
5．研究了用固湘障取预分离，高效液相色谱法测定满山红中槲皮素和杜鹃素。满山红中的槲皮素和杜鹃素用90％甲醇加热回流提取，提取液用Waters Sep-Pak-C18固相萃取小柱预分离，以安捷仑ZORBAX Stable Bound(4.6×50mm,1.8μm)色谱柱为固定相，0.2％的磷酸和甲醇(52/48)为流动相，在该色谱条件下，槲皮素和杜鹃素在1.0min内可达到基线分离。方法标准回收率为98％～102％，相对标准偏差为1.6～1.8％，可用于快速测定满山红样品中的槲皮素和杜鹃素含量，结果满意。