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本试验以初步筛选到的我国西南区32份野生狗牙根种质资源为材料,并以栽培品种为对照,从形态学水平、DNA分子水平和抗旱生理等方面进行遗传多样性和资源评价、筛选研究,为狗牙根育种的深入研究及种质资源的科学合理开发利用提供理论依据。主要研究结果如下:
1.对我国西南区32份野生狗牙根资源10个表型性状的变异进行了统计及聚类分析,结果表明:(1)我国西南区不同狗牙根资源的表型性状具有广泛的变异性,其变异系数排序为:匍匐枝条叶长>直立枝条叶长>营养枝高>匍匐茎节间长>花序轴长>生殖枝高>匍匐枝条叶宽>直立枝条叶宽>匍匐茎茎粗>花序分枝个数。(2)通过主成分分析,从供试材料中筛选到两份具有较好综合表型性状的材料,它们分别是来自四川汶川的Sau02011和四川宜宾的“川南”狗牙根。(3)对32份材料进行聚类分析,可聚为五类,表型特征相似的材料首先聚为一类,聚类结果与材料地理来源部分一致。
2.采用SRAP分子标记技术,对采自中国四川、重庆、贵州、西藏四省区的32份野生狗牙根(Cynodondactylon)材料进行遗传多样性分析,获得下述结果:(1)用14对引物组合共得到132条多态性条带,平均每对引物扩增出9.4条多态带,多态性位点百分率为79.8%,材料问的遗传相似系数范围在0.591到0.957之间,平均GS值为0.759,这些结果说明,供试野生狗牙根具有较为丰富的遗传多样性。(2)对所有材料进行聚类分析,可聚为4类,大部分来自相同或相似生态地理环境的材料聚为一类,表明供试材料的聚类和其生态地理环境间有一定的相关性。(3)基于Shannon多样性指数估算了6个狗牙根生态地理类群内和类群间的遗传分化,发现类群内遗传变异占总变异的65.56%,而类群间遗传变异占总变异的34.44%。(4)对各生态地理类群基于Nei氏无偏估计的遗传一致度的聚类分析表明,各生态地理类群间的遗传分化与其所处的生态地理环境具有一定的相关性。
3.以聚乙二醇(PEG)作为渗透胁迫剂,对5份狗牙根品种(系)进行干旱胁迫。观测其植株叶片相对含水量、叶绿素总含量、相对电导率、游离脯氨酸含量以及丙二醛含量。随着PEG-6000浓度的提高以及胁迫时间的延长,狗牙根叶片相对含水量和叶绿素总含量呈递减趋势:相对电导率和丙二醛含量呈递增趋势;游离脯氨酸含量则先递增后达到一个峰值,随后稍微有点下降。对5个理化指标的抗旱系数进行隶属函数分析,得出各狗牙根的抗旱性由强到弱的顺序为:Sau02011、川南狗牙根、南京狗牙根、Tifway、Sau9928。