论文部分内容阅读
本文主要从以下几个部分展开论述： 第一部分：骨骼肌中Camkk2在成肌细胞增殖分化以及线粒体增殖中的功能研究 CaMKK2是CaMK家族中的一员，它下游有众多的靶基因，包括CaMKⅠ，CaMKⅣ和近些年被证实的AMPK，因此CaMKK2具有整合多条信号通路的能力，是一种多功能的信号分子。目前的研究发现，CaMKK2参与机体中很多重要的生理过程，例如机体葡萄糖的动态平衡;巨噬细胞的激活和迁移;前列腺癌的发生和发展;以及饮食摄入量的调节。然而，作为AMPK重要的上游调控蛋白，CaMKK2在骨骼肌中的功能却很少有研究报道。 在骨骼肌的发育过程中，增殖和分化的过程最为重要，它们控制着骨骼肌的生长和细胞功能的决定。因此，我们从最基本的功能着手，研究CaMKK2对朋细胞增殖和分化的作用。实验中，发现CaMKK2不仅阻止成肌细胞增殖，而且也可以抑制成肌细胞的分化;体内实验中过表达CaMKK2延迟骨骼肌的再生过程。在能量代谢方面，我们观察到CaMKK2能够促进PGC-1α表达，从而增加骨骼肌中线粒体数目。 第二部分：甲状腺激素通过miR-133a1调控骨骼肌肌纤维分型 众所周知，甲状腺激素是骨骼肌肌纤维类型的重要调控因子之一，但其中的很多调控机制仍不清楚，尤其在表观遗传学方面，需要进一步的研究。在对甲状腺激素的研究中，我们发现，骨骼肌中特异性的miR-133a1是甲状腺激素的直接靶基因。有趣的是，我们发现miR-133a在快速糖酵解类型的骨骼肌中具有较高的表达，而且它能够改变骨骼肌中快慢肌纤维的类型。进一步的研究中，我们找到了转录因子TEAD1，并证实TEAD1是miR-133a的直接靶基因，而已有报道TEAD1是一个与肌纤维类型决定有关的转录因子。此外，体内抑制miR-133a能够拮抗甲状腺激素对于骨骼肌肌纤维类型的调控作用;TEAD1的表达也可以回复miR-133a对肌纤维类型的改变。通过体内和体外一系列的实验结果，我们证明甲状腺激素能够通过miR-133a和靶基因TEAD1来负调控慢肌中MHC基因表达。 综上，我们提出了一个新的表观遗传调控机制，即甲状腺激素通过miR-133a抑制转录因子TEDA1，从而负调控慢肌相关基因表达。我们相信，这一研究结果将给甲状腺激素作用机制的研究开辟一条新的思路。