两株抗结核分枝杆菌(TB)活性植物内生链霉菌代谢产物研究

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从雷公藤、车桑子植物中分离得到两株植物内生链霉菌Streptomycesspp.YIM65484和YIM65033,活性结果表明具有抗结核分枝杆菌(TB)活性。本论文以其为目标菌进行代谢产物研究。通过化学筛选,确定5号培养基(乳糖25.0g,玉米浆5.0g,葡萄糖5.0g,甘油15.0g,大豆粉10.0g,胰蛋白胨5.0g,(NH4)2SO42.0g,FeCl20.1g,ZnCl20.1g,MnCl20.1g,Mg2SO40.5g,H2O1L,pH7.4)为菌株YIM65484最佳发酵培养基;确定15号培养基(可溶性淀粉20.0g,NaCl0.5g,麦芽膏2.0g,KNO31.0g,KH2PO40.5g,Mg2SO40.5g,FeSO40.01g,H2O1L,pH7.4-7.6)为菌株YIM65033最佳发酵培养基,分别扩大发酵并进行代谢产物的研究。  结合TLC检测法,采用柱层析、HPLC制备、重结晶等多种分离方法,从YIM65484菌株的发酵产物中,分离得到14个单体化合物。并利用质谱、核磁共振等波谱数据对其结构进行解析,确定了4个化合物的化学结构,确定其为环(酪氨酸-丙氨酸)、胸腺嘧啶核苷、吲哚甲酸、N-乙酰基色胺;从菌株YIM65033发酵产物中分离得到18个单体化合物,通过核磁共振波谱数据对其结构解析,确定了9个化合物的化学结构,为尿嘧啶、环(酪氨酸-酪氨酸)、环(酪氨酸-缬氨酸)、环(酪氨酸-亮氨酸)、环(酪氨酸-异亮氨酸)、环(苯丙氨酸-丝氨酸)、酪氨酸、胸腺嘧啶核苷、4-羟基苯乙酰胺。  活性检测结果表明,大部分单体化合物对金黄色葡萄球菌(Staphyloccocusaureus),大肠杆菌(Escherichiacoli),枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis),结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)具有不同程度的抑菌活性。环(酪氨酸-丙氨酸)、环(酪氨酸-亮氨酸)、环(酪氨酸-异亮氨酸),N-乙酰色胺、4-羟基苯乙酰胺均具有抗结核分枝杆菌的活性,这是首次报道这些物质对抗结核分支杆菌具有抗菌活性。
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