大豆子叶节和茎尖再生及农杆菌介导的茎尖转化影响因素的研究

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本研究以大豆品种“合丰35”为材料,研究了不同浓度的6-BA和诱导时间等因素对子叶节和茎尖不定芽分化的影响,并对影响农杆菌介导的大豆茎尖转化的几个因素进行了探讨。为建立稳定的大豆子叶节和茎尖再生系统,进一步提高转化效率奠定了基础。主要结果如下: 1. 在大豆子叶节再生研究中,大豆萌发和子叶节不定芽诱导的最佳6-BA浓度分别为0.4 mg·l-1和1.1 mg·l-1;子叶节不定芽诱导的基本培养基B5优于1/2MSB5;诱导时间为10d左右。每个子叶节分化出3.56个不定芽。 2. 在大豆茎尖再生研究中,不定芽诱导的最佳6-BA浓度为3.5 mg·l-1;最适诱导时间为24h左右;不同基因型大豆茎尖再生中以“东农42”的再生频率为最高,平均每个茎尖外植体分化出3.04个不定芽。 3. 在农杆菌介导的大豆茎尖转化的影响因素研究中,初步探讨了L-半胱氨酸、硝酸银和脯氨酸对转化的影响。初步认为共培养培养基中分别加入600 mg·l-1 L-半胱氨酸、2 mg·l-1硝酸银或6 mg·l-1脯氨酸可以明显提高转化后GUS阳性外植体所占比例。
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