【摘 要】
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该研究的目的是获得在酵母细胞内同时大量积累赖氨酸和苏氨酸的菌株,希望能用于工为规模的生产.我们以一株工业啤酒酵母为出发菌株,经甲乙硫醚(EMS)诱变处理后,在含赖氨酸类
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该研究的目的是获得在酵母细胞内同时大量积累赖氨酸和苏氨酸的菌株,希望能用于工为规模的生产.我们以一株工业啤酒酵母为出发菌株,经甲乙硫醚(EMS)诱变处理后,在含赖氨酸类似物S-2-氨基乙基-L-半胱氨酸(AEC)的液体培养基中进行连续筛选,最后从AEC抗性平板上获得到8株赖氨酸高产的突变株,其胞内游离的赖氨酸含量比出发菌株提高6倍以上,其中一突变株BI2的胞内游离的赖氨酸含量占细胞干重的9.6﹪,比出发菌株提高30多倍.再以此菌株经EMS二次诱变处理,以同样的方法,在含苏氨酸类似物2-氨基-3-羟基戊酸(AHV)的抗性平板上和甲硫氨酸的类似物乙硫氨酸(ETH)抗性平板上继续筛选,获得一突变株(AECAHVETH),其胞内游离的苏氨酸占细胞干重的0.45﹪,比出发菌株提高4倍多,同时胞内游离的赖氨酸占细胞干重的6.4﹪.对此菌株的生理生化特性和培养条件进行了研究,先采用了Placket-Burma的统计方法,对发酵培养基中7种成分进行分析,结果四种成份即酵母膏、葡萄糖、蔗糖和蛋白胨对胞内赖氨酸的含量影响显著(可信度水平在90﹪以上).然后运用响应在面法(Respond surface methodology),采用中心组合设计对这四种主要影响因子与响应值胞内赖氨酸的含量和菌体密度进行分析,通过建立一个模拟的二次回归方程,确定主要影响因子的最佳浓度.
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