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本研究共分为三个部分。第一部分:胃癌术后辅助治疗与胃癌临床生存的相关性分析,第二部分:胃癌相关免疫组化分子与胃癌临床预后的相关性分析,第三部分:阿帕替尼联合放疗在胃癌治疗中的增敏作用及机制。第一部分胃癌术后辅助治疗与胃癌临床生存的相关性分析【目的】由于地域差异导致社会组成,生活习惯,医疗策略及癌症筛查方式的不同,东西方国家对于胃癌根治术术后采取的辅助治疗策略不尽相同。本研究旨在对比胃癌根治术后,术后辅助化疗及术后辅助放化疗在亚洲胃癌人群中的生存获益及复发模式。【方法】本研究前瞻性入组自2013年1月至2017年12月,于华中科技大学同济医学院附属同济医院就诊的经胃癌根治术及术后辅助性放化疗治疗的胃腺癌患者（共201例）,而后回顾性收集整理同时期在我院进行胃癌根治手术及辅助性化疗的患者资料（共2489例）。以多因素Logistic回归模式进行倾向性配比分析,完成辅助化疗组入组人群的配对。最终辅助放化疗组入组（CRT组）201名,辅助化疗组（CT组）入组199名。随后进行电话随访并记录患者相关生存信息及治疗后副反应,主要研究终点为DFS,次要研究终点为OS及副反应。利用Kaplan-Meier模型绘制生存曲线,使用分层比例风险Cox模型计算危险比（HRs）,P＜0.05被认为差异具有统计学意义。【结果】本研究的中位随访时间为47.9个月（24.1至71.8个月）,两组人群共发生153例复发事件及129例死亡事件。CT组的3年DFS为45.7%,CRT组为60%（P=0.043）,而CT组的3年OS为55.8%,CRT组为64.2%（P=0.102）。在亚组分析中,将所有患者重新分为1组（LN阳性率0-75%）和2组（LN阳性率75%-100%）,结果发现1组中3年DFS延长,差异有统计学意义（CT组46.7%,CRT组65%;P=0.024）;3年OS延长,差异有统计学意义（CT组52.7%,CRT组68.1%;P=0.031）。多因素Cox分析发现,胃癌根治术后辅助放疗显着延长患者3年DFS,HR,0.626;95%CI,0.421-0.931;P=0.021,并且显著延长患者3年OS,HR,0.646;95%CI,0.429-0.971;P=0.036。【结论】本中心胃癌患者根治术后,辅助放化疗相较于辅助化疗,可以显著延长患者3年DFS,但未能延长3年OS。亚组分析发现淋巴结阳性率小于75%的胃癌患者,胃癌根治术后,辅助放化疗可以显著延长3年DFS及3年OS。第二部分胃癌相关免疫组化分子与胃癌临床预后的相关性分析【目的】胃癌在我国发病率及死亡率都位居第二,仅次于肺癌。虽然大多数胃癌组织学类型为腺癌,但胃癌具有高度地域异质性,胃癌的发病率主要集中于东亚,西亚,拉丁美洲,以及部分欧洲国家。近些年,尽管胃癌诊治方面有不小的进展,局晚期胃癌的生存时间仍无明显延长。在我国,局晚期胃癌患者5年生存率仍为20-29%,转移性胃癌患者中位生存时间为9-10个月。目前,针对胃癌的临床决策并无黄金标准,我们仍需精准的分子分型及生物标志物,帮助制定临床治疗方案及判断临床预后,尽可能提高治疗疗效延长胃癌患者生存时间。【方法】收集自2013年1月至2017年12月至华中科技大学同济医学院附属同济医院就诊的胃癌根治术和术后辅助放化疗或者辅助化疗的胃腺癌患者的临床特征信息及术后组织学标本（共328例）。主要运用免疫组织化学方法对入组患者的术后病理学肿瘤部位组织标本进行染色。主要检测包括:HER-2、P53、TP、VEGF、Ki-67。各指标表达状态与临床特征间的相关性分析用卡方（χ2）检验,各指标不同表达的生存分析用Kaplan-Meier生存分析方法,多因素分析运用Cox风险比例回归模型,P＜0.05被认为差异有统计学意义。【结果】在总人群中,TP（-）与TP（+）的患者相比较,3年OS延长（均未达到m OS,P=0.034）;Ki-67（0-30%）与Ki-67（30-100%）的患者相比较,3年DFS明显延长,Ki-67（30-100%）为33个月,其余未达m DFS,P=0.007,但Cox多因素分析结果的差异不具有统计学意义。在术后辅助CRT人群中,单因素分析发现,P53（-）人群与P53（+）人群相比较,3年OS延长,HR,0.370;95%CI,0.174-0.786;P=0.01。后纳入其他因素进行多因素分析,调整后HR,0.378;95%CI,0.150-0.998;P=0.049。结果表示,P53（-）可以作为胃癌放疗后的独立预后因子。其余病理分子组内差异无统计学意义。CRT组与CT组相比较,亚组分析中,我们发现TP（+）人群中,3年DFS明显延长（HR,0.592;95%CI,0.354-0.990;P=0.046）。P53（-）人群中,3年OS明显延长（HR,0.378;95%CI,0.174-0.823;P=0.014）。HER-2（0-2+）人群,3年DFS明显延长（HR,0.693;95%CI,0.485-0.990;P=0.044）。Ki-67（0-30%）人群中,3年DFS明显延长（HR,0.222;95%CI,0.073-0.678;P=0.008）。但以上四个预测指标,经过多因素回归分析后,除Ki-67（0-30%）及P53（-）的结果依旧有统计学意义,其他结果的差异不具有统计学意义。(TP（+）,调整后HR,0.606;95%CI,0.337-1.089;P=0.094;HER-2（0-2+）调整后HR,0.692;95%CI,0.476-1.005;P=0.053;Ki-67（0-30%）调整后HR,0.141;95%CI,0.027-0.740;P=0.021;P53（-）调整后HR,0.253;95%CI,0.079-0.805;P=0.020。该结果提示,Ki-67（0-30%）及P53（-）的胃癌患者,术后更适合辅助放化疗治疗。【结论】本研究通过检测5项免疫组化指标对入组的胃腺癌患者进行胃癌相关免疫组化分子及胃癌预后的相关性进行分析,结论为:（1）.P53可以作为胃癌术后放化疗患者的独立预后因子。（2）.胃癌根治术后Ki-67（0-30%）及P53（-）的人群更适合辅助放疗,即Ki-67（0-30%）及P53（-）可作为胃癌根治术后辅助放疗疗效的独立预测因子。第三部分阿帕替尼联合放疗在胃癌治疗中的增敏作用及机制【目的】通过离体及在体动物实验探究阿帕替尼联合放疗在胃癌治疗中的价值。【方法】体外实验选择SGC7901,MGC803,MKN45,AGS四种胃癌细胞株,采用Western Blot检测各细胞株VEGFR-2的表达情况。采用梯度浓度变化的阿帕替尼预处理肿瘤细胞72小时,然后采用CCK-8检测各个细胞阿帕替尼的IC50值。根据结果选择VEGFR-2表达最高的SGC7901进行后续试验。SGC7901分别接受单纯阿帕替尼及放疗联合阿帕替尼处理,采用CCK-8检测细胞增殖能力变化,通过克隆形成实验建立单击多靶模型,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期分布情况。体内实验选择6周鼠龄的BALB/c NUDE裸鼠,建立皮下移植瘤模型,分别设置为对照组,单纯阿帕替尼组,单纯放疗组,序贯1组（先给予放疗后给予阿帕替尼）,序贯2组（先给予阿帕替尼后给予放疗）,及同步组（放疗与阿帕替尼同步给予）,每组6只裸鼠,共36只。验证阿帕替尼联合放疗的抗肿瘤作用。【结果】阿帕替尼对高表达VEGFR-2的SGC7901有明显的增殖抑制作用。阿帕替尼联合放疗与放单纯放疗比较,在6Gy及8Gy时,抑制率更明显且有统计学意义（P＜0.01）。后续克隆形成实验建立SGC7901的单击多靶模型,SER=1.72。且细胞凋亡实验通过流式细胞术验证,阿帕替尼在体外放疗增敏的作用机制可能是通过增加肿瘤细胞凋亡。体内实验,阿帕替尼联合放疗组,不论药物射线的组合方式,裸鼠存活时间平均值为13天,实验期间并未观察到明显的瘤体生长延缓差异。【结论】离体实验中,阿帕替尼可以提高VEGFR-2高表达的胃癌细胞的放疗敏感性,机制与阿帕替尼增加放疗所致的细胞凋亡有关。但在体实验,阿帕替尼联合放疗与单纯放疗比较,并未明显增强抗肿瘤效应。