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目的 通过研究血流干预药物止血敏的凝血和蚓激酶的活血作用以及健脾活血中药“糖胃康”对糖尿病运动障碍大鼠胃黏膜和黏膜免疫相关的神经、胃肠激素之间相互调节的影响,明确血流因素在糖尿病胃动力障碍发病机制中的作用以及神经内分泌免疫网络在糖尿病胃动力障碍发病中的作用,阐明健脾活血代表方“糖胃康”对糖尿病胃动力障碍大鼠神经内分泌免疫网络的影响。以揭示糖尿病胃动力障碍发病的内在机制,并部分明确中药“糖胃康”治疗糖尿病胃动力障碍的作用部位、环节及分子机制,为中药防治糖尿病胃动力障碍开辟新方法和理论依据,为临床治疗糖尿病胃动力障碍提供一个有效的中药制剂。 材料方法 取SPF级131只SD雄性大鼠,体重160±20g,随机分为两组,其中正常组10只,造模组121只,所有动物禁食12h后,于次日清晨空腹状态下测血糖,剔除血糖过高或偏离正常值较大的动物,称重,一次性腹腔注射0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液链脲佐菌素(STZ)给造模组,注射剂量60mg/kg,正常对照组大鼠单次腹腔注射等容量的0.1mol/L(pH4.5)柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,至造模后第7天起,所有实验大鼠检测血糖值,以血糖≥16.7 mmol/L为造模成功。 将造模成功的大鼠按计算机随机数字表随机分为模型组、止血敏组(20只左右)、蚓激酶组(30只左右)和中药(30只左右)组。造模成功后第3天起,中药组大鼠予中药,以1g/1ml的水煎剂灌胃;止血敏组大鼠予止血敏灌胃;蚓激酶组大鼠予蚓激酶腹腔注射;模型组和正常组大鼠予等量蒸馏水灌胃,以上三组均每周组药6次,周日不给药。所给药物剂量相当于成人临床常用剂量2倍。 每天观察并记录动物一般状态(包括饮食、排泄、分泌物、毛发、精神状态、自主运动、眼白内障等、死亡等的变化)。每三周称体重一次,按新体重重新计算给三药的给药药量。于造模成功的第17周和第30周空腹测血糖一次,然后做胃排空实验确定糖尿病胃轻瘫大鼠模型成功建立。 第30周,从大鼠心脏采血,取血清测量胰岛素、C肽,测定血脂四项和超过氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA),取血浆做血液流变学的检测;处死大鼠取其胰岛尾部进行中性甲醛固定后包埋、切片做苏木素—伊红染色(HE染色)及特殊染色—醛品红-橙黄G染色,观察胰岛破坏情况;用幽门螺杆菌试纸(Hp)对胃窦黏膜进行检测后,取胃窦分别进行中性甲醛固定、包埋、切片,做HE染色进行胃窦部黏膜、肌肉层、微血管病变和淋巴细胞的观察,然后用甲苯胺蓝染肥大细胞、Masson法观察神经纤维,用免疫组化法检测胃窦黏膜凋亡基因Bcl-2、Fas、炎性肿瘤坏死因子—α(TNF—α)和白细胞介素1(IL-1β)以及神经递质5—羟色胺(5—HT)、一氧化