人成牙本质细胞体外培养的实验研究

来源 :锦州医学院 辽宁医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:taorong19880903
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目的:探索成牙本质细胞体外培养所需的外部条件,为建立成牙本质细胞体外模型以研究其生理、病理功能提供实验依据.为体外培养人牙进行体内移植以及研究人成熟成牙本质细胞在龋病等病理条件下的功能变化奠定基础 方法:本实验以检测蛋白质的形成来鉴定成牙本质细胞是否成活,实验共分三组。实验一组以培养的细胞加入DMEM+Ham’sF12(1:1)为培养基,二组加入0.9%等渗生理盐水代替培养基,三组以死髓牙加入DMEM+F12(1:1)作为空白对照。以无龋坏的人第三磨牙(18-25岁)及双尖牙(15-20岁)为实验对象。检测方法以每天收集髓腔内的培养基做SDS-PAGE电泳,然后作银染色。牙髓细胞做HE染色光镜观察。成牙本质细胞作SEM观察。 结果:根据实验观察,在培养的第三天有蛋白质生成而且持续增多直到培养的第六天。牙髓细胞在光镜下可见大量的成纤维细胞。SEM观察,可见成牙本质细胞层位于牙本质和髓室之间。而且培养3天、5天的成牙本质细胞,与新鲜牙髓腔内的成牙本质细胞无明显差异。盐水对照组在培养的前三天培养基内有蛋白质染色条带,第4天以后无蛋白质条带。空白对照组结果显示,自始至终在培养液内无蛋白质染色条带出现。 结论:采用器官培养法,用无血清培养基DMEM+ham’SF12可以使成牙本质细胞在体外培养成功,并维持其细胞学特征。
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