论文部分内容阅读
背景:多囊卵巢综合征(PCOS)是最常见的妇科内分泌疾病之一,在青春期及育龄期妇女中的发病率较高,大约为5%-10%。PCOS的发病机制极其复杂,多年研究发现PCOS是一种多基因异常与环境因素相互作用所引起的疾病。近年越来越多的学者发现细胞凋亡也是参与PCOS发病的重要因素,多种凋亡调控因子如Bcl-2、Bax、Fas、Fas L、p53及Caspase1、3、9等均参与了颗粒细胞凋亡的调控过程从而影响PCOS发病。之前有学者通过构建PCOS鼠模型,发现肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)及其受体——死亡受体4(death receptor 4,DR4)、诱骗受体1(decoy receptor1,Dc R1)在其卵泡颗粒细胞异常表达,推测TRAIL及其受体在PCOS的发病过程中有重要作用。目前关于TRAIL及其受体DR4、Dc R1在多囊卵巢综合征患者卵泡颗粒细胞中的研究甚少,本研究试图通过检测TRAIL及其受体DR4、Dc R1在多囊卵巢综合征患者颗粒细胞的表达,探讨其在PCOS发病中的意义。目的:1.检测TRAIL及其受体DR4、Dc R1在PCOS患者颗粒细胞中的表达,研究TRAIL及其受体DR4、Dc R1在PCOS患者的表达特点。2.与正常人群对比,分析TRAIL及其受体DR4、DcR1在两组人群表达差异,初步探讨其与PCOS发病的关系及意义。方法:本研究纳入于2016年8月至2017年4月在青岛大学附属医院生殖科就诊行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的PCOS不孕患者及对照组各30人。收集两组患者相关临床资料并于取卵日收集两组患者的卵泡液,提取卵巢颗粒细胞后用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析TRAIL及其受体DR4、Dc R1在两组人群卵巢颗粒细胞的表达情况;蛋白免疫印迹试验(Western blot)法检测各组颗粒细胞TRAIL及其受体DR4、Dc R1蛋白表达情况。结果:1.临床特点比较:PCOS组患者与对照组之间年龄、基础E2、FSH、P、BMI、TSH、GN天数、HCG日内膜厚度、优胚率之间差异无统计学意义(P>0.05),PCOS组基础LH、T、HCG日E2、HCG日1.4cm以上卵泡数、获卵数、2PN数、优胚数、形成胚胎数都是高于对照组的,差异有统计学意义(P<0.05),PCOS组Gn用量较对照组少,差异有统计学意义。2.RT-PCR结果显示,PCOS组患者卵巢颗粒细胞TRAIL m RNA的表达较对照组明显增强(P<0.01),DR4 m RNA在两组患者卵巢颗粒细胞的表达无显著性差异(P>0.05),Dc R1 m RNA在PCOS组患者的颗粒细胞表达较对照组明显减弱(P<0.01)。3.Western blot结果提示TRAIL蛋白在PCOS组颗粒细胞表达较对照组增加(P<0.05),DR4蛋白在PCOS组表达较对照组增加(P>0.05),Dc R1蛋白在PCOS组明显减弱(P<0.05)。结论:1.TRAIL在PCOS患者颗粒细胞高表达,Dc R1在PCOS患者颗粒细胞低表达。2.TRAIL及Dc R1的异常表达可能通过参与颗粒细胞凋亡调控作用导致PCOS发病及影响妊娠结局。