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目的:探讨骨髓基质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)移植对APP/PS1双转基因小鼠海马组织△Np73表达的影响,从而近一步阐述BMSCs移植在阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)治疗中的作用机制。
方法:实验对象为APP/PS1双转基因小鼠12只,将小鼠随机分为mBMSCs移植组及假手术对照组,每组各6只。将GFP标记并经流式细胞分子生物学标记筛选后扩增得到的GFP-mBMSCs细胞接种于小鼠海马组织,于接种前后用Morris水迷宫系统对小鼠进行行为学分析。脱颈处死移植后饲养两周的小鼠,取海马组织,GFP-mBMSCs移植海马切片用荧光显微镜观察其游走及存活情况,采用免疫组化法检测海马切片中老年斑数量,采用Western blot检测两组△N-p73的表达。
结果:APP/PSI双转基因小鼠海马组织内存在类似人类AD的老年斑沉积,随月龄增加而增多。Morris水迷宫实验结果显示GFP-mBMSCs移植后小鼠找到平台所需的时间少于移植前(P<0.05),明显少于假手术组(P<0.01)。脱颈处死移植后两周的小鼠,荧光显微镜下可见移植GFP-mBMSCs存活并均匀分布于海马及齿状回细胞层。老年斑检测结果显示mBMSs移植可使APP/PSI双转基因小鼠海马组织内老年斑数量减少消散(P<0.01)。Western-Blot观察到mBMSCs移植组△Np73表达水平明显高于对照组(P<0.01)。
结论:BMSCs移植可以明显改善APP/PSI双转基因小鼠记忆和认知能力,可以减少海马组织内老年斑的数量且海马脑组织中ANp73的表达上调。