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牛肝菌是一类著名的外生菌根真菌，也是森林生态系统中的重要生物类群之一，许多种类具有极高的营养价值和药用价值。由于不能进行人工栽培，日常消费的牛肝菌完全依靠采摘获得。长期对野生牛肝菌资源无序过度地采集，加之其生存环境的恶化，致使野生牛肝菌的产量和质量都在下降。因此开展牛肝菌菌株培育和子实体诱导的研究成为国内外微生物和食用菌研究人员十分关注的研究课题。牛肝菌人工驯化栽培的关键是获得性状优良的纯培养菌株，基于此，利用云南丰富的牛肝菌资源，本文对不同来源的多种牛肝菌进行了分离培养研究，取得如下研究结果：
1.研究发现牛肝菌的最佳分离培养基为PDA培养基，最佳分离材料为中熟子实体菌盖处菌肉：
2.采用12种培养基对多种牛肝菌进行了分离，并用8种培养基进行继代培养，最终获得两个性状稳定的纯培养菌株lq4-2和be2425。ITS序列比对之后，将菌株lq4-2鉴定为Boletus sp.；将菌株be2425鉴定为美味牛肝菌(Boletus edulis)；
3.对菌株lq4-2和be2425的生物学特性进行了初步研究，结果表明：两株菌在天然PDA培养基上生长速度最快且生长势最好，合成培养基中MRD培养基培养效果最好。两株菌的最适生长温度为25℃～28℃，最适生长pH为5～6；菌株lq4-2的最佳碳源为葡萄糖，而菌株be2425的最佳碳源为果糖和葡萄糖；两株菌最适宜的氮源都是酒石酸铵。
从南华、易门和峨山三个牛肝菌主产区收集了数十个市售食用牛肝菌子实体样品，经ITS序列分析，得到以下结果：
1.来自三个样地的白牛肝分为两个类群，大多数实验样品集为一群，并与广义美味牛肝菌复合群中的夏生牛肝菌(Boletus aestivalis)、铜色牛肝菌(B.aereus)、网纹牛肝菌(B.reticulatus)具有极近的亲缘关系。只有一个样品另外成群，并与粉孢牛肝菌属的苦粉孢牛肝菌(Tylopilus felleus)具有很近的亲缘关系。
2.所有黑牛肝样品分为三个类群，一个类群(包含大多数样品)与褐绒柄牛肝菌菌株Boletus cf.subvelutipes MES244具有较近的亲缘关系。另外两个类群各包含一个样品，其中，样品B1E与茶褐牛肝菌(Boletus brunneissimus)具有极近的亲缘关系，结合形态学特征将其鉴定为茶褐牛肝菌(B.brunneissimus)。
3.所有红牛肝样品分属于5个类群。来自峨山的红牛肝样品独立构成一个类群，具有明显的地域分布性。另一个类群鉴定为华丽牛肝菌，由来自南华和易门的样品共同组成。此外，样品R3N和R8N构成第三个单独的类群，亦显现出地域分布性。另外两个类群分别由来自易门的R10Y和R9Y构成，其中，R10Y与美丽牛肝菌(Boletuspulcherrimus)和细网牛肝菌(Boletus satanas)具有很近的亲缘关系；R9Y鉴定为Xerocomus sp.，与GenBank中的菌株Xerocomus sp.Kun7具有极近的亲缘关系，序列相似性达到98%。
4.所有黄牛肝样品均归并于同一个类群，结合形态学特征将其鉴定为远东疣柄牛肝菌(Leccinum extremiorientale)。
5.系统发育分析及ITS序列相似性比对结果表明，云南市售牛肝菌中黑牛肝和红牛肝两个类群具有丰富的多样性，而白牛肝和黄牛肝的多样性较低。