论文部分内容阅读
二维高效液相色谱系统以其快速、高效、自动化程度高等优势已经发展成为分离复杂样品的重要工具。为了达到理想的分离效果，必须对所建立的联用模式进行优化，而接口技术的设计决定了二维联用系统的实际分离效能目前二维液相色谱接口技术仍延续了多年前的发展模式，没有很大的突破，并且存在一些局限性:样品环的使用增大样品的展宽，降低了灵敏度，捕集柱虽然避免这一不足，但是对两维的填料有所限制，平行柱没有以上缺点，但是仍然要求两维的流动相必须兼容等等。在解决大分子的分离问题上，这些接口技术虽然已经比较成熟，但在小分子和复杂化合物的分离检测上，接口技术仍待改进。因此发展新的高分辨率、高灵敏度检测的二维分离方法与技术显得尤为重要。 本课题组发现，并行连接的两根色谱柱，若样品区带用低流速从第一维色谱柱转移到第二维后，再用高流速进行分离，则样品区带在第二维得到显著的压缩，从而分离柱效得到明显提高。本文工作利用这种独特原理，发展了一种新型的二维接口技术，搭建了一种二维纳升级苯硼酸亲和柱/反相色谱柱(2D-BAC/RP)系统，考察了第一维流速及第二维流速对分离效果的影响以及系统的重现性，并且优化了第二维切割窗口时间，通过实际样品的分析验证了该系统的应用前景。实验结果表明，此种联用方法采用该接口技术解决了两维分离流动相不兼容的难题以及第一维馏分在第二维柱头的扩散问题，样品区带不仅可以定量地从第一维转移至第二维，而且区带被压缩了，使得第二维分离获得较高的分离度和灵敏度，有效地提高了分析物的柱效。另外，组分峰高以及峰面积都具有更好的重现性，并且实验设计的微型化二维色谱体系，所用样品耗量少，样品前处理简单，实际样品的分离也得到丰富的信息，此种新型二维液相色谱的仪器操作较为简单，为复杂样品的分离提供技术支持。