论文部分内容阅读
目的：研究白藜芦醇(resveratrol,RES)对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rats,SHR)左心室重塑的影响及其对沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulation2homolog1,SIRT1)/核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路的作用。
方法：将8只8周龄雄性Wistar-京都大鼠(Wistar-Kyoto rat,WKY)作为正常组(N组)，将40只8周龄雄性SHR随机分为高血压模型组(S组)、RES组(R组)、EX527组(E组)、RES+EX527组(R+E组)、RES+PDTC组(R+P组)，每组8只。R组给予RES50mg/(kg·d)干预，E组给予EX5275mg/(kg·d)干预，R+E组给予RES50mg/(kg·d)和EX5275mg/(kg·d)干预，R+P组给予RES50mg/(kg·d)和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)100mg/(kg·d)干预。实验过程每天观察大鼠的一般情况，每2周测量体重、收缩压(systolic pressure,SBP)，干预12周之后用心脏超声测定大鼠左心室肥厚程度并评估心功能；之后处死大鼠，分离左心室，称量左心室重量并计算左心室重量指数(left ventricular mass index,LVMI)；HE和Masson染色观察心脏形态学改变，并测量心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)；ELISA测定心肌组织活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的水平；Western blot测定SIRT1、NF-κB、转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fa ctor,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)蛋白的表达水平。
结果：实验结束时，SHR各组大鼠SBP均明显高于N组(P＜0.05)，SHR各组之间SBP无明显差异(P＞0.05)，N组实验结束时SBP较实验前无明显变化(P＞0.05)；各组大鼠体重无明显差异(P＞0.05)。与N组[LVMI(2.12±0.10)mg/g,CVF(0.18±0.09)%,ROS(293.94±36.67)U/mL,MDA(3.95±0.28)nmol/mL,SOD(222.56±13.90)U/mL,蛋白表达量：SIRT11.40±0.05,NF-κB0.46±0.06,TGF-β10.33±0.04,TNF-α0.41±0.08,IL-60.44±0.10]相比，S组[LVMI(3.07±0.07)mg/g,CVF(2.60±0.56)%,ROS(456.22±25.55)U/m L,MDA(5.59±0.40)nmol/mL,SOD(152.50±15.22)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.78±0.08,NF-κB1.41±0.08,TGF-β11.44±0.11,TNF-α1.32±0.07,IL-61.32±0.04]LVMI、CVF明显增加(P＜0.05)，心脏超声提示左心室发生明显肥厚，镜下观察心肌肥大、心肌纤维坏死及纤维化严重，ROS、MDA和NF-κB、TGF-β1、TNF-α、IL-6蛋白表达明显增加(P＜0.05)，SOD和SIRT1蛋白表达明显降低(P＜0.05)。与S组相比，R组[LVMI(2.72±0.09)mg/g,CVF(1.10±0.30)%,ROS(420.26±23.84)U/mL,MDA(4.98±0.49)nmol/mL,SOD(192.40±15.15)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.99±0.07,NF-κB0.98±0.12,TGF-β10.86±0.10,TNF-α0.95±0.12,IL-60.99±0.11]左心室肥厚和心肌纤维化程度较S组明显改善，SOD和SIRT1蛋白表达增加(P＜0.05)，LVMI、CVF、ROS和NF-κB、TGF-β1、TNF-α、IL-6蛋白表达明显降低(P＜0.05)，MDA有所降低但差异无统计学意义(P＞0.05)；E组[L VMI(3.18±0.08)mg/g,CVF(2.83±0.98)%,ROS(515.98±31.64)U/mL,MDA(6.34±0.24)nmol/mL,SOD(113.50±15.32)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.60±0.02,NF-κB1.68±0.07,TGF-β11.80±0.11,TNF-α1.54±0.18,IL-61.57±0.08]左心室肥厚和心肌纤维化程度有加重趋势，LVMI、ROS、MDA和NF-κB、TGF-β1、TNF-α、IL-6蛋白表达增加(P＜0.05)，SOD和SIRT1蛋白表达降低(P＜0.05)，CVF有所升高但差异无统计学意义(P＞0.05)。与R组相比，R+E组[LVMI2.87±0.08mg/g,CVF(1.90±0.59)%,ROS(433.28±24.83)U/mL,MDA(5.37±0.25)nmol/mL,SOD(166.08±25.79)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.82±0.05,NF-κB1.14±0.16,TGF-β11.15±0.13,TNF-α1.11±0.09,IL-61.22±0.09]有逆转RES改善左心室重塑的趋势，LVMI、CVF和TGF-β1、TNF-α、IL-6蛋白表达增加(P＜0.05)，SIRT1蛋白表达降低(P＜0.05)，ROS、MDA和NF-κB蛋白表达有所增加而SOD有所降低，但差异均无统计学意义(P＞0.05)；R+P组[LVMI(2.50±0.11)mg/g,CVF(0.57±0.34)%,ROS(376.64±28.25)U/mL,MDA(4.48±0.30)nmol/mL,SOD(209.02±16.45)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.99±0.09,NF-κB0.59±0.06,TGF-β10.55±0.15,TNF-α0.78±0.11,IL-60.67±0.14]有更为改善左心室肥厚和心肌纤维化程度的趋势，SIRT1蛋白表达无明显差异(P＞0.05)，LVMI、CVF、ROS和NF-κB、TGF-β1、IL-6蛋白表达明显降低(P＜0.05)，SOD有所增加而MDA和TNF-α蛋白表达有所降低，但差异均无统计学意义(P＞0.05)。
结论：RES能减轻SHR左心室肥厚和心肌纤维化程度，从而改善左心室重塑，其机制可能与调节SIRT1/NF-κB通路、减轻氧化应激和炎症反应损伤有关。
方法：将8只8周龄雄性Wistar-京都大鼠(Wistar-Kyoto rat,WKY)作为正常组(N组)，将40只8周龄雄性SHR随机分为高血压模型组(S组)、RES组(R组)、EX527组(E组)、RES+EX527组(R+E组)、RES+PDTC组(R+P组)，每组8只。R组给予RES50mg/(kg·d)干预，E组给予EX5275mg/(kg·d)干预，R+E组给予RES50mg/(kg·d)和EX5275mg/(kg·d)干预，R+P组给予RES50mg/(kg·d)和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)100mg/(kg·d)干预。实验过程每天观察大鼠的一般情况，每2周测量体重、收缩压(systolic pressure,SBP)，干预12周之后用心脏超声测定大鼠左心室肥厚程度并评估心功能；之后处死大鼠，分离左心室，称量左心室重量并计算左心室重量指数(left ventricular mass index,LVMI)；HE和Masson染色观察心脏形态学改变，并测量心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)；ELISA测定心肌组织活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的水平；Western blot测定SIRT1、NF-κB、转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fa ctor,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)蛋白的表达水平。
结果：实验结束时，SHR各组大鼠SBP均明显高于N组(P＜0.05)，SHR各组之间SBP无明显差异(P＞0.05)，N组实验结束时SBP较实验前无明显变化(P＞0.05)；各组大鼠体重无明显差异(P＞0.05)。与N组[LVMI(2.12±0.10)mg/g,CVF(0.18±0.09)%,ROS(293.94±36.67)U/mL,MDA(3.95±0.28)nmol/mL,SOD(222.56±13.90)U/mL,蛋白表达量：SIRT11.40±0.05,NF-κB0.46±0.06,TGF-β10.33±0.04,TNF-α0.41±0.08,IL-60.44±0.10]相比，S组[LVMI(3.07±0.07)mg/g,CVF(2.60±0.56)%,ROS(456.22±25.55)U/m L,MDA(5.59±0.40)nmol/mL,SOD(152.50±15.22)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.78±0.08,NF-κB1.41±0.08,TGF-β11.44±0.11,TNF-α1.32±0.07,IL-61.32±0.04]LVMI、CVF明显增加(P＜0.05)，心脏超声提示左心室发生明显肥厚，镜下观察心肌肥大、心肌纤维坏死及纤维化严重，ROS、MDA和NF-κB、TGF-β1、TNF-α、IL-6蛋白表达明显增加(P＜0.05)，SOD和SIRT1蛋白表达明显降低(P＜0.05)。与S组相比，R组[LVMI(2.72±0.09)mg/g,CVF(1.10±0.30)%,ROS(420.26±23.84)U/mL,MDA(4.98±0.49)nmol/mL,SOD(192.40±15.15)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.99±0.07,NF-κB0.98±0.12,TGF-β10.86±0.10,TNF-α0.95±0.12,IL-60.99±0.11]左心室肥厚和心肌纤维化程度较S组明显改善，SOD和SIRT1蛋白表达增加(P＜0.05)，LVMI、CVF、ROS和NF-κB、TGF-β1、TNF-α、IL-6蛋白表达明显降低(P＜0.05)，MDA有所降低但差异无统计学意义(P＞0.05)；E组[L VMI(3.18±0.08)mg/g,CVF(2.83±0.98)%,ROS(515.98±31.64)U/mL,MDA(6.34±0.24)nmol/mL,SOD(113.50±15.32)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.60±0.02,NF-κB1.68±0.07,TGF-β11.80±0.11,TNF-α1.54±0.18,IL-61.57±0.08]左心室肥厚和心肌纤维化程度有加重趋势，LVMI、ROS、MDA和NF-κB、TGF-β1、TNF-α、IL-6蛋白表达增加(P＜0.05)，SOD和SIRT1蛋白表达降低(P＜0.05)，CVF有所升高但差异无统计学意义(P＞0.05)。与R组相比，R+E组[LVMI2.87±0.08mg/g,CVF(1.90±0.59)%,ROS(433.28±24.83)U/mL,MDA(5.37±0.25)nmol/mL,SOD(166.08±25.79)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.82±0.05,NF-κB1.14±0.16,TGF-β11.15±0.13,TNF-α1.11±0.09,IL-61.22±0.09]有逆转RES改善左心室重塑的趋势，LVMI、CVF和TGF-β1、TNF-α、IL-6蛋白表达增加(P＜0.05)，SIRT1蛋白表达降低(P＜0.05)，ROS、MDA和NF-κB蛋白表达有所增加而SOD有所降低，但差异均无统计学意义(P＞0.05)；R+P组[LVMI(2.50±0.11)mg/g,CVF(0.57±0.34)%,ROS(376.64±28.25)U/mL,MDA(4.48±0.30)nmol/mL,SOD(209.02±16.45)U/mL,蛋白表达量：SIRT10.99±0.09,NF-κB0.59±0.06,TGF-β10.55±0.15,TNF-α0.78±0.11,IL-60.67±0.14]有更为改善左心室肥厚和心肌纤维化程度的趋势，SIRT1蛋白表达无明显差异(P＞0.05)，LVMI、CVF、ROS和NF-κB、TGF-β1、IL-6蛋白表达明显降低(P＜0.05)，SOD有所增加而MDA和TNF-α蛋白表达有所降低，但差异均无统计学意义(P＞0.05)。
结论：RES能减轻SHR左心室肥厚和心肌纤维化程度，从而改善左心室重塑，其机制可能与调节SIRT1/NF-κB通路、减轻氧化应激和炎症反应损伤有关。