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研究目的： 探讨肝硬化大鼠肝移植动物模型的建立方法，及其与正常大鼠肝移植免疫学变化可能存在的不同影响。进一步研究预输注通过处理后的供者凋亡细胞是否可以诱导肝硬化大鼠肝移植免疫耐受，为临床诱导肝移植的免疫耐受提供新的思路和可行的方法。 材料与方法： 一、供、受体均为SD大鼠，用四氯化碳蓖麻油溶液制作大鼠肝硬化模型，用双袖套法制作大鼠原位肝移植模型进行实验，建立肝硬化大鼠的原位肝移植模型。采用自制套管，供受体SD大鼠均取腹部横切口，受体无肝期前预置门静脉缝扎牵引线，肝上下腔静脉采用血管膜端端“三定点”吻合法，门静脉及肝下下腔静脉采用袖套吻合法，用自制“小针钩”排气。观察肝硬化大鼠7周后的肝脏病理结果，及其行原位肝移植后的成功率。 二、Wistar大鼠10只，随机分2组。正常组：正常Wistar大鼠不作处理，取脾脏分离脾细胞。地塞米松组(Dex)：地塞米松连续3天，第4天取脾脏分离脾细胞。采用AnnexinV联合PI双标法流式细胞仪测定细胞凋亡情况。 三、供体为Wistar大鼠，受体为SD大鼠。实验分正常组、正常手术对照组伽一Control组)、肝硬化手术对照组(C一Contr01组)，地塞米松体内处理组(Dex组)、脾细胞组(SpC组)和地塞米松体内处理的脾细胞组(Dex一sPC组)。正常组SD大鼠只采尾静脉血作肝功能对照;N一Control组供体和受体大鼠均不作处理;C一Control组供体不作预处理，受体为肝硬化大鼠;Dex组术前10天用地塞米松腹腔注射处理供体大鼠共3天，受体大鼠为肝硬化大鼠，不输供体大鼠脾细胞;SpC组不用地塞米松处理供体大鼠，受体为肝硬化大鼠，术前7天输供体大鼠脾细胞(5xl夕);Dex一sPc组术前10天用地塞米松腹腔注射预处理供体大鼠共3天，受体大鼠为肝硬化大鼠，术前7天经阴茎背静脉输注供体大鼠脾细胞(5、107)。观察各组大鼠移植术后的存活时间，术后1周肝功能(ALT、TBIL)及病理变化。 结果: 一、(l)肝硬化大鼠7周肝脏病理结果证实为肝硬化(见附图l:正常肝脏，2:肝硬化肝脏，3:肝硬化病理切片，4:肝硬化病理切片)。病理可见肝细胞变性、坏死，细胞索排列紊乱，纤维组织大量增生，将肝实质分割成大小不同的假小叶。(2)行大鼠原位肝移植术26次，其中正式实验20次。改进后正式实验，供体手术时间25一35 min，平均29 min;袖套准备及肝脏修整时间8一13 min，平均10 min;受体手术时间45~60min，平均5 1 min;无肝期14~23 min，平均17 min。正式实验Zd存活率9oo’0(15/20)，l周存活率85%(17/20)。 二、地塞米松体内处理后的脾细胞凋亡率(33.5肚624%)，较正常大鼠脾细胞凋亡率(0.7肚0.11%)明显增高(P<0.ol)。 三、(l)各组大鼠术后存活时间:N一Control组(n=7) MST二10天、C一Control组(n=8)MST=17天和Dex组(n=8)MST=16天，术后存活时间无明显差别;Spc组(n一8) MST=28天，较N一Control组、C一Contr01组和Dex组存活时间明显延长;Dex一SpC组(n=8)MST>60天，较其它各组均显著延长。(2)各组大鼠术后1周肝脏急性排斥反应的病理变化:N一Control组、C一Conirol组和Dex组肝脏急性排斥反应的病理RAI评分在6一9之间，排斥反应较SpC、Dex一spC组重;SPC组肝脏急性排斥反应的病理RAI评分在4一6之间，排斥反应较前三组轻，较Dex一SPC组重;Dex一SpC组肝脏急性排斥反应的病理RAI评分在3一5之间，排斥反应最轻。(3)各组大鼠术后1周肝功能变化:N一eontrol组、e一eontrol组、oex组、Spe组和nex一spC组肝功能TBIL和ALT较正常组均升高;N一Control组、C一Control组和Dex组肝功能示TBIL和ALT较spc组和Dex一SPC组均明显增高;SpC组肝功能示TBIL和ALT稍低于N一Control组、C一Control组和Dex组，高于Dex-SpC组;Dex一SpC组肝功能示TBIL和ALT明显低于N一Control组、C一eontrol组、nex组和SpC组。 结论: 改进的双袖套法大鼠原位肝移植术可在单人直视下进行，安全确切实用。所有吻合均应无张力、保持原位，耐心细致的手术操作是模型成功的关键。 地塞米松体内处理的供体脾细胞预输注能够诱导肝硬化大鼠同种异体肝移植免疫耐受。地塞米松诱导供体脾细胞凋亡，预输注的脾细胞不仅提供了凋亡细胞，也提供了供体抗原，受体吞噬细胞吞噬凋亡脾细胞可以产生免疫抑制，受体抗原提呈细胞在免疫抑制的环境下加工和处理抗原，产生免疫无反应性，从而对随后植入的移植物产生免疫耐受。 凋亡细胞预输注可以诱导肝硬化大鼠肝移植免疫耐受，提示肝脏在诱导肝移植免疫耐受过程中并非起主要作用。