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口腔癌是全球常见的、发病率排第六位的恶性肿瘤。尽管过去的四十年中在外科、放化疗以及联合用药方面取得了很大的进步，但在改善口腔癌患者的预后方面的进展却不明显，因此，迫切需要新的治疗途径和方法。
表皮生长因子受体(EGFR)属于ErbB家族的酪氨酸激酶受体，包括口腔癌在内的多种实体性恶性肿瘤中EGFR均有过度表达，而抑制EGFR的酪氨酸激酶(TK)活性可以阻碍肿瘤的生长、转移和血管生成，并促进肿瘤细胞的凋亡，提高化疗、放疗及激素治疗的效果。作为肿瘤治疗的新靶点，其研究已历时20余年。近年来，可有效抑制EGFR-TK的生物及化学药物正在逐步应用于临床实践。
F84是由中国医学科学院药物研究所合成室冯志强副研究员合成的一个具有自主知识产权的新型EGFR-TK抑制剂，属于苯胺喹唑啉类化合物。本研究以PD153035为阳性对照药物，主要观察F84在体内外对口腔癌的生长抑制作用，并对其作用机制进行初步探讨，试图为F84将来用于口腔癌的临床辅助治疗提供一定的实验基础和理论依据。
1.F84体外对口腔癌抑制作用及其机理研究1.1F84对口腔癌细胞增殖作用的影响应用MTT法发现F84可抑制多种体外培养的口腔癌细胞(包括KB、KB/V、Tca8113、Tca83、A83和Hep—2)的生长，体外的半数抑制浓度IC50范围为7.27～44.16μmol/L。应用SRB(硫化罗丹明B)法观察F84对上述口腔恶性肿瘤细胞生长的影响，结果证实了F84可抑制这些口腔癌细胞的体外生长，其在体外的半数抑制浓度GI50范围为2.17～17.36μmol/L。两个实验的数据均显示，F84对口腔癌的抑制作用具有一定的肿瘤活性谱，其中对KB和KB/V细胞的生长抑制作用较为显著。
1.2F84对口腔癌细胞的细胞周期和凋亡的影响流式细胞分析(FCM)表明，F84对KB和KB/V细胞的细胞周期均无明显影响。F84可诱导KB/V细胞的凋亡，但并不能诱导KB细胞的凋亡。
1.3F84对EGFR信号通路相关靶蛋白的影响WesternBlot的结果显示，F84在体外可明显抑制KB/V细胞的磷酸化EGFR的表达，对KB和KB/V细胞的其它EGFR信号通路的相关靶蛋白均无明显影响。
上述体外实验结果提示，F84在体外可选择性抑制口腔癌细胞的生长，但其体外作用弱于PD153035，这可能和F84是PD153035的前体，需经体内代谢降解，酯键断裂形成PD153035后，再发挥其抑制EGFR酪氨酸激酶(EGFR-TK)活性的作用有关。
2.F84体内抗口腔癌作用及其机理研究2.1F84对DMBA诱发的实验性口腔癌的抑制作用采用DMBA诱发的金黄地鼠颊囊癌模型观察F84对实验性口腔癌的抑制作用，结果发现F84可使实验组的平均瘤数目、平均肿瘤体积及平均瘤负荷明显低于阳性对照组，同时使异常增生数目和鳞癌数目明显下降。Brdu细胞增殖指数的免疫组化研究显示，高低剂量组的F84均可使Brdu阳性率明显下降，和阳性对照组的19.04％相比，其范围在8.06％～8.80％之间。
2.2F84对人口腔癌细胞裸鼠异体移植瘤的抑制作用应用裸鼠异体移植瘤模型观察F84对人口腔癌KB、KB/V细胞异体移植瘤生长的影响，结果发现，F84可抑制KB细胞裸鼠异体移植瘤的生长，但对KB/V细胞的裸鼠异体移植瘤无明显抑制作用。Ki67细胞增殖指数的免疫组化研究结果显示，F84可使KB细胞移植瘤的ki67阳性细胞率明显降低。TUNEL法检测F84对KB细胞移植瘤的凋亡情况的影响，结果显示，F84可诱导KB细胞的凋亡，但作用较弱。采用WesternBlot的方法观察F84对KB细胞移植瘤标本中的EGFR相关信号通路靶蛋白的影响，结果发现F84可明显抑制磷酸化EGFR的表达，但对EGFR、Stat3、P—Stat3、MAPK及P—MAPK等其它靶蛋白的表达无明显影响。
综上所述，F84在体外表现出对不同来源的口腔癌细胞有选择性地抑制作用，但其作用机制尚不明确。在体内，F84可抑制DMBA诱发的实验性口腔癌以及人口腔癌KB细胞的裸鼠异体移植瘤的生长，其作用机制可能是F84抑制了酪氨酸激酶的催化活性和酪氨酸的自磷酸化，而抑制口腔癌细胞EGFR的活化，从而阻断EGFR下游信号的传导，抑制口腔癌细胞的增殖并诱导细胞凋亡，从而达到抑制口腔癌发生的目的。因此，F84有望成为新型的辅助治疗口腔癌的靶向药物之一。