水仙多糖及生物碱的提取、纯化与检测

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本文以漳州水仙为材料,采用用热水浸提、有机溶剂萃取分别提取多糖和生物碱,建立并优化了水仙多糖的提取纯化体系,优化了水仙生物碱的提取体系。后续又运用液相色谱、气相色谱、红外光谱等方法对水仙多糖进行了分析检测。希望能为以后水仙多糖和生物碱的研究提供方法参考,为开发水仙的经济价值提供新思路,让漳州水仙发挥更大的价值。本文的研究成果如下:1.通过对水仙不同部位、不同取样时期多糖含量研究,得到结论:多糖含量的高低为休眠期水仙鳞茎球>开花期水仙鳞茎球>水仙花葶、花和叶。2.通过正交试验对热水浸提法提取条件进行优化。建立了最优的提取体系为提取时间5.5h,提取温度100℃,液固比10∶1(ml/g),乙醇加量比5∶1(醇沉时加入无水乙醇量ml/样品溶液量ml)。提取条件对提取水仙鳞茎粗多糖的影响主次顺序为:提取温度>液固比>提取时间>乙醇加量比。在最优条件下提取中国水仙粗多糖(CPNS),CPNS的得率为6.51%。3.通过研究建立了水仙多糖纯化与检测体系:经过冻融分级,sevage法脱蛋白,透析法除小分子等步骤完成CNPS纯化,得到NPS。采用面积归一化法计算多糖样品纯度为99%。经过旋光仪测得水仙多糖的旋光值[α]D25=-17.0(c0.1;H2O)。采用红外光谱法测得水仙多糖为酸性β吡喃多糖。通过气相图谱分析,得知,水仙多糖由岩藻糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖组成,各单糖组分的摩尔比为2.39∶23.37∶1.00∶12.08。采用高效体积排阻色谱法(HPSEC)测得出水仙精多糖的相对平均分子量约为30900Da。4.通过对比多糖和生物碱的溶解性质,本研究创新性地以水仙鳞茎提取多糖后的残渣为材料提取生物碱,并对水仙生物碱的提取方法进行筛选优化。得到最优提取条件为料液比为1∶20,提取温度为70℃水浴,提取时间4h,萃取溶剂选用三氯甲烷,萃取2次。在此最优条件下提取生物碱的得率达到0.077%。综上所述,通过对水仙多糖和生物碱的研究,分别建立水仙多糖的提取纯化体系和水仙生物碱的提取分离体系,并对水仙多糖的结构特征进行了分析检测,为以后研究多糖和生物碱提供参考,为开发水仙的生物活性物质提取提供了新思路,为开发水仙的经济价值提供新途径。
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