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第一部分：不同浓度胆红素对离体小鼠耳蜗组织的作用 目的：观察不同浓度胆红素对离体培养小鼠耳蜗组织的损伤效应 方法：取新生5天的C57BL/6J小鼠。通过解剖显微镜，解剖获得附带有螺旋神经节的耳蜗基底膜组织。离体培养48小时后，在倒置显微镜下观察，选择长势良好的耳蜗基底膜组织，入选实验。将选中的耳蜗基底膜组织随机分为四组：对照组、25μmol/L胆红素组、50μmol/L胆红素组、100μmol/L胆红素组。分组完毕后进行药物处理。实验组培养基按照分组浓度，加入相应胆红素溶液，对照组培养基加入相应容积的生理盐水。所有标本在药物处理24小时后，终止培养。对其进行组织固定和免疫荧光染色。并通过激光共聚焦显微镜观察。最后行统计学分析。 结果：原代培养耳蜗基底膜组织成功，获得足够数量以及活性良好的耳蜗基底膜组织；25μmol/L胆红素组中神经纤维减少，内毛细胞和外毛细胞形态和数量无变化；50μmol/L胆红素组中神经纤维明显减少，内毛细胞和外毛细胞形态和数量无变化；100μmol/L胆红素组中神经纤维几乎完全消失，内毛细胞和外毛细胞形态和数量无变化。数据经Kruskal-Wallis检验后得出，各实验组的神经纤维数与对照组的神经纤维数之间的差异有统计学意义（P＜0.05），且各个实验组之间的神经纤维数之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论：胆红素对于离体培养的新生小鼠的耳蜗组织的神经纤维的毒性作用呈浓度依赖性；在胆红素浓度不超过100μmol/L时，胆红素对于离体培养的新生小鼠的耳蜗组织的内毛细胞和外毛细胞不造成损害。 第二部分：富氢盐水拮抗胆红素对小鼠耳蜗组织的作用 目的：观察氢是否可以拮抗胆红素的小鼠耳蜗神经毒性作用 方法：取新生5天的C57BL/6J小鼠。通过解剖显微镜，解剖获得附带有螺旋神经节的耳蜗基底膜组织。离体培养48小时后，在倒置显微镜下观察，选择长势良好的耳蜗基底膜组织，入选实验。将选中的耳蜗基底膜组织随机分为两组：对照组：50μmol/L胆红素+生理盐水；实验组：50μmol/L胆红素+富氢盐水。分组完毕后进行药物处理。每个培养基中加入相应浓度的胆红素溶液。同时，实验组中加入富氢盐水，对照组加入相应容积的生理盐水。所有标本在药物处理24小时后，终止培养。对其进行组织固定和免疫荧光染色。并通过激光共聚焦显微镜观察。最后行统计学分析。 结果：富氢盐水组的神经纤维数多于对照组的神经纤维数。数据经成组T检验后得出，实验组的神经纤维数与对照组的神经纤维数之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论：富氢盐水拮抗胆红素对耳蜗神经纤维组织的毒性作用。