甘油和硅油保存家兔角膜的对比研究

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角膜病(Keratopathy)是当今世界主要的致盲眼病之一[1],由于各种原因导致的角膜瘢痕或混浊会影响视力,角膜移植(Corneal transplant)成为治疗此种角膜病的重要手段[2]。随时为临床提供高质量的角膜片是角膜移植术(Keratoplasty)成功的关键,保存角膜片的方法可分为非活性和活性保存两类[3],其中非活性保存的原理是脱去角膜的水分[4],抑制组织细胞中的酶活性和自溶[5]。常用的保存剂有甘油和分子筛[6],但是此种角膜片脱水后坚硬,复水后严重水肿,手术时准确剖切难度大[7],层间疤痕和植床植片剖切不均匀导致的角膜透明度不高和术后散光限制其应用[8]。现探求一种新的非活性保存方法,能够符合板层角膜移植要求,并且使角膜片透明度好、更接近新鲜角膜厚度以便于剖切。硅油常用作眼后段手术填充物,具有性质稳定、毒性低等优点,无明显吸水性,不溶于水[9],作为角膜片保存剂可隔绝外界环境。现探求硅油保存的家兔角膜片能否符合板层移植要求,并与传统甘油保存法比较。  目的  探究硅油保存家兔角膜的可行性,并比较甘油和硅油两种保存方法的优缺点。  方法  30 只健康家兔经耳缘静脉栓塞处死后立即取眼球制作角膜片,硅油保存法角膜片(30只)作为实验组,甘油保存法角膜片(30只)作为对照组,对两种方法保存的家兔角膜片进行大体透明度观察,分别在1周、1月及3月时对两组角膜片进行常规苏木精-伊红(HE)染色切片观察、对两组保存液检测细菌生长状态、测量两组角膜片中央厚度。  结果  1、1周时甘油组和硅油组(各30只)角膜片均透明,无裂纹或破裂情况。1月时甘油组(30只)均透明,硅油组2只半透明,余(28只)透明,无裂纹或破裂情况。3月时甘油组(30只)均透明,硅油组5只半透明,余(25只)透明,无裂纹或破裂情况。  2、常规HE染色切片显示1周时甘油组和硅油组胶原纤维束均呈层排列,直径均匀,实质层内可见实质细胞,细胞无皱缩。1月时甘油组和硅油组与1周时相比,实质细胞少,部分皱缩。3月时甘油组胶原纤维束直径欠均匀,轻度肿胀,实质层内无角膜实质细胞。而硅油组胶原纤维束排列较紧密。  3、1周、1月和3月时甘油组和硅油组保存液经细菌学检测均无细菌生长。  4、1周和1月时甘油组与硅油组清洗后中央角膜厚度的变化量不同,甘油组的变化量大于硅油组的变化量。  结论  1、硅油保存家兔角膜符合板层角膜移植基本条件。  2、短期(1月内)硅油保存的家兔角膜片较甘油保存的清洗后水肿程度轻,厚度接近新鲜角膜。
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