利用RNAi研究ICF45蛋白在BEL—7402细胞中的功能

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本文论述了生物学信息分析揭示:ICF45蛋白是一个进化上高度保守的蛋白。RNAi初步揭示ICF45可能是一个细胞周期正调节因子,保证细胞周期进程正常进行。   本文选择了人肝癌细胞(BEL-7402)作为研究材料。利用RNAi技术,通过设计、选择两个19bp干扰片段,构建了特异性针对ICF45蛋白的hairpinsiRNA表达质粒:pAVU6+27/ICF45/HP1和pAVU6+27/ICF45/HP2。用Superfect法转染BEL-7402细胞,经G418筛选,通过间接免疫荧光检测,获得了稳定沉默ICF45基因表达的克隆细胞株。   本文揭示ICF45蛋白能积极参与细胞分裂进程的正常运行,而且因pAVU6+27/ICF45/HP2的干扰效果明显强于pAVU6+27/ICF45/HP1表明其基因的靠近3端的相关区域可能是其行使功能的关键区域。   
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