肺癌细胞系中p53基因调控通路相关基因MDM2和AnnexinA2的功能研究

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本研究应用RT-PCR和Western Blot方法对mRNA差异展示结果验证表明经Adv-p53诱导后Annexin A2基因表达明显下调,并以高转移潜能肺癌细胞系Anip973的表达下降最为显著。同时应用Western Blot方法对不同病理组织学特性的肺癌细胞系中AnnexinA2基因的蛋白水平进行分析。结果显示AnnexinA2表达水平在转移潜能高的肺癌细胞中相对较高。 为进一步探讨AnnexinA2基因在肺癌细胞中的作用,本研究构建Annexin A2基因的真核正义表达载体和siRNA分别转染高转移肺巨细胞癌细胞系BE1,从而诱导AnnexinA2基因的过表达和表达沉默。体外培养稳定转染后BE1细胞,通过普通光镜和电子显微镜观察表明Annexin A2基因的过表达和表达沉默均影响细胞形态。应用MTT比色法发现Annexin A2基因对细胞增殖有一定影响,基因的过表达促进细胞生长;基因沉默诱导细胞生长阻滞。Adv-p53感染稳定转染后BE1细胞促使细胞凋亡,Hoescht染色表明AnnexinA2基因过表达对p53基因介导的细胞凋亡有促进作用。 本研究应用RT-PCR和SuperArray方法研究两对来源相同转移潜能不同的肺癌细胞,肺癌细胞在感染Adv-p53后MDM2表达量明显增高,其表达水平与p53基因的过表达水平保持一致趋势。
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