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克罗恩病是一种慢性非特异性炎症性肠病,在欧美发病率较高,近年来在亚洲发病率呈上升趋势。克罗恩病病因不明,尚无治愈方法,是当前国际上一个研究热点。环境——基因间的相互作用是克罗恩病发病机制的重要组成部分。miRNAs作为转录后调控的关键因子,参与环境对基因表达的调节,并且miRNAs在克罗恩病肠黏膜中的异常表达会导致肠黏膜屏障功能的紊乱。饮食是与克罗恩病密切相关的环境因素之一,也是目前克罗恩病治疗的重要组成部分,但其作用机制不明很大限制了营养治疗方案的优化。新的证据提示饮食可以通过改变miRNAs影响基因表达,克罗恩病中肠内营养与miRNAs的关系亟待研究。 本论文拟通过观察单一肠内营养诱导缓解治疗对成人克罗恩病患者的治疗效果及对比治疗前后患者末端回肠肠黏膜的miRNAs表达谱,探明单一肠内营养治疗诱导克罗恩病缓解是否与肠黏膜miRNAs的表达变化有关,从而部分揭示肠内营养的作用机制,并为探索克罗恩病新的治疗靶点及疾病标志物提供目标方向。全文的主要研究内容和结果如下: 活动期成人克罗恩病患者末端回肠病变及正常肠黏膜miRNAs表达谱的研究。采用高通量芯片检测及扩大样本量的qRT-PCR验证相结合的方法,对符合入组条件的16名成人克罗恩病患者及10名健康志愿者末端回肠肠黏膜miRNAs表达谱进行比较研究。结果显示成人克罗恩病患者末端回肠病变及正常肠黏膜均具有其特有的miRNAs表达谱,并与健康肠黏膜miRNAs表达有显著差异,其中,hsa-miR-192-5p在病变黏膜的下调表达,hsa-miR-495-5p在患者正常黏膜的过表达,以及hsa-let-7b-5p和hsa-miR-361-3p在患者病变与正常黏膜中的差异表达被qRT-PCR确认。 单一肠内营养诱导缓解治疗对成人克罗恩病患者治疗效果的研究。首先,采用白天少量多次口服,夜间自行插入鼻饲管鼻饲摄入整蛋白型肠内营养制剂的治疗方案对13名符合入组条件的成人克罗恩病患者进行为期4周的诱导缓解治疗,观察临床治疗效果及此治疗方案对患者生活质量的影响,结果显示经治疗,11名(84.6%)患者达到临床缓解标准,治疗前后临床评价指标如CDAI评分,血清CRP水平等均有明显降低;10名(76.9%)患者生活质量恢复正常,治疗后IBDQ评分较治疗前显著提高,并且多数(61.5%)患者表示愿意再次接受该治疗方案进行疾病的诱导缓解。其次,我们采用上述肠内营养治疗方案对12名符合入组条件的成人克罗恩病患者进行诱导缓解治疗,观察临床治疗效果的同时,重点比较治疗前后内镜下的肠黏膜表现,结果显示10名(83.3%)患者达到临床缓解标准,治疗后,末端回肠及结肠黏膜愈合率分别为41.7%和25%,改善率分别为66.7%和37.5%,且内镜下溃疡相关总评分及末端回肠评分均有明显降低(P=0.005,0.009),结肠评分无明显差异。 单一肠内营养诱导CD缓解后的患者末端回肠肠黏膜miRNAs表达谱的研究。采用高通量芯片检测及扩大样本量的qRT-PCR验证相结合的方法,对上述10名治疗后达到缓解标准并行肠镜复查的成人克罗恩病患者及10名健康志愿者的末端回肠黏膜miRNAs表达谱进行比较研究。肠镜复查时,于原病变肠黏膜愈合区域再次取捡。结果显示,经单一肠内营养诱导缓解后,患者末端回肠肠黏膜miRNAs表达谱发生显著改变,部分miRNAs的异常表达得到逆转,比治疗前患者正常肠黏膜的miRNAs表达谱更为接近健康对照肠黏膜。hsa-let-7b-5p在活动期患者病变及正常肠黏膜中均低表达,经EEN治疗表达水平恢复正常,且肠黏膜hsa-let-7b-5p表达水平在治疗前后均与血清CRP水平显著相关。 综上,本论文提示单一肠内营养治疗可以在有效诱导成人克罗恩病缓解的同时,提高患者生活质量并促进内镜下肠黏膜的愈合,这一作用可能与单一肠内营养可以改变肠黏膜miRNAs的表达谱使之趋于正常有关。此外,肠黏膜hsa-let-7b-5p的表达水平与患者炎症状态密切相关,也许可以用作早期评价黏膜炎症状态的生物学标志物。