论文部分内容阅读
高血压是最常见的心血管疾病之一,它日益困扰着高血压患者的身心健康,因此对降血压药物的研究也越来越多。血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）具有降血压的作用,本文以大蒜残渣为原料,通过蛋白酶酶解制备出天然的ACEI活性肽,为了提高其活性,进行了超滤纯化。为了满足体外检测功能因子ACEI肽对ACE抑制作用的需要,本文进行了从新鲜猪肺中提取血管紧张素转化酶（ACE）的研究。采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）和胶束电动毛细管电泳色谱（MECC）分别对猪肺提取物进行活性检测,测得其比活力为3.7U/10mL。建立了胶束电动毛细管电泳检测ACEI活性的方法,其检测条件为:分离电压28kV:采取压力进样,进样压力0.5psi:上样时间5S;柱温25℃:电极缓冲液:50mmol/L（含1%SDS）硼酸盐缓冲液,pH8.3:检测波长228nm。本文以水解液的抑制率为试验控制指标,从9种商业蛋白酶中筛选出一种最佳蛋白酶,并得出其最优作用条件为:反应温度50℃、加酶量4%、底物浓度8%、pH8。在该作用条件下,其水解液对ACE的抑制率为85.98%。选用Millipore公司的超滤设备对水解上清液进行超滤,选取截留分子量为10k的超滤膜。以样品温度和操作压力对10k超滤膜通量的影响为根据,得出10k超滤膜的最优操作条件为:样品温度40～50℃、操作压力0.09MPa左右。超滤后的ACEI活性肽的IC50值为2.15 mg/mL。大蒜残渣ACEI活性肽具有很好的热稳定性,但在酸性条件下不稳定,需在pH值为8.3的条件下,冷藏保存。此外该ACEI活性肽能抵抗肠胃蛋白酶的作用,说明其经口服后很可能仍具有降血压作用。