论文部分内容阅读
T细胞在活化过程中细胞的表面和细胞内部发生了一系列生理、生化的变化。目前，科学家们已经知道了T细胞在活化过程中一些细胞膜表面的蛋白质发生了怎样的变化，但是在此过程中，细胞的膜成分是否发生改变，迄今尚未有任何研究报道。1976年M.J.Crumpton等首先分析了猪淋巴细胞膜的脂成分。但作为最普遍使用的实验动物小鼠，至今无人对其膜脂成分进行分析。
本课题以ICR小鼠为研究对象，通过分级离心、密度梯度超速离心等方法，提取小鼠淋巴细胞细胞膜成分，以及经过刀豆蛋白A(ConA)激活不同时间的小鼠淋巴细胞膜成分，脂抽提了膜脂成分。在尝试得到高效液相色谱HPLC分离和定量磷脂的最佳条件后，使用高效液相色谱HPLC分析检测了正常ICR小鼠淋巴细胞膜的磷脂组成，包括磷脂酰胆碱(PC)，磷脂酰乙醇胺(PE)以及鞘磷脂(SM)，得出的结论是ICR小鼠淋巴细胞膜主要磷脂成分是磷脂酰胆碱(PC)，占73.5％，其次是磷脂酰乙醇胺(PE)，占24.8％，而鞘磷脂(SM)只占淋巴细胞膜磷脂组成的1.8％左右。
在此基础上，我们初步探索了Con A激活前后淋巴细胞膜主要磷脂成分的变化，发现ConA激活T细胞后细胞膜主要磷脂成分发生了一定的变化，三种主要磷脂成分都大幅减少。本文进一步通过气相色谱-飞行时间质谱联用方法(GC/TOF-MS)分析了正常状态下ICR小鼠淋巴细胞膜磷脂中不饱和脂肪酸链的组成，包括不饱和度和碳链长度，从而为了解T细胞激活过程中细胞膜成分的变化及细胞膜结构与功能的改变的深入研究奠定了良好的基础。