【摘 要】
：
提取人胎肝λ TriplEx噬菌体cDNA文库的总DNA作模板,按文 献资料设计引物,经PCR扩增得到人促红血细胞生成素受体(hEpoR)胞外区和跨膜区基因片段.将该基因片段克隆到质粒pGEM
【出 处】
：
中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
论文部分内容阅读
提取人胎肝λ TriplEx噬菌体cDNA文库的总DNA作模板,按文 献资料设计引物,经PCR扩增得到人促红血细胞生成素受体(hEpoR)胞外区和跨膜区基因片段.将该基因片段克隆到质粒pGEM-7Zf上,序列分析证明其正确性.将hEopR胞外区基因通过EcoRI/BamHI位点克隆到达载体pBV-220上.为提高表达将蛋白开始若干氨基酸残基改造成大肠杆菌偏嗜性密码子.将表达载体导入大肠杆菌BL21(DE3),以温控诱导表达.为提高表达量对培养条件进行了筛选与改进.获得的表达蛋白以包涵体形式存在.凝胶电泳扫描结果显示表达率为10%ˉ20%,分子量约为29KD.表达蛋白的抗原性由sEpoR多克隆抗体进行Western-blotting鉴定.用谷胱甘肽法复性蛋白.通过DEAE-Sepharose阴离子交换柱纯化蛋白,用NaCl梯度洗脱,最后纯度为82%.表达的蛋白质N端测序结果与发表序列一致(APPPNLPDPKF);并检测到该蛋白对Epo刺激下的TF-1细胞的生长有明显抑制作用.结论:获得了与Epo有结合活性的人促红细胞生成素受体胞外区蛋白.
其他文献
在建筑工程建设过程中,必须做好造价管理工作.不仅可以维护企业的经济利益,还可以保障企业的工程质量,最终提升企业的整体形象,促进企业的发展.然而,造价管理工作是一个动态
棘球白素类化合物是新一代的抗真菌药物，它们的应用是在治疗真菌感染上一个里程碑式的成就。它们抑菌的机制是通过非竞争性的抑制1，3-β-葡聚糖合成酶的活性，导致真菌细胞壁不能
在电力系统的输送电板块中,500kV超高压输电线路是整个输电网络的重要组成部分。多年运行经验表明,工频过电压和操作过电压是造成电网内高压设备损坏的重要原因之一,如果不认真分析并采取相应防护措施则极有可能影响电网稳定运行。加之500kV超高压输电线路常年暴露在自然环境中,遭受雷击的概率比较大,危害同样很大。因此对500kV输电线路进行过电压计算,了解过电压情况,以便采取防护措施,防止过电压损坏设备,
全球环境恶化和传统能源枯竭促使人们将目光转向新能源领域。诸多已有的清洁能源发电形式中,风力发电技术最成熟而备受瞩目。本文在充分了解当前风电发展状况基础上,重点研究额定风速以下双PWM型永磁直驱风电系统网侧和机侧的矢量控制策略。介绍风力机的基本特性并比较现有的几种最大风能利用方式后,选定功率信号反馈(PSF)控制为所搭建仿真系统的最大功率跟踪控制策略。根据矢量变换思想推导变流器在同步旋转坐标系下的数
Receptor for Activated C Kinase1(RACK1)是真核生物中广泛存在的一类WD40家族的脚手架蛋白。RACK1的功能主要是提供蛋白质-蛋白质相互作用的平台。拟南芥RACK1蛋白共有三个
随着社会发展的脚步加快,人们对能源的需求越来越大.电能作为人们生活与工作中最重要的能源之一,对人类进步起着不可替代的作用.近几年,国家也在提倡新能源的开发,大规模的光
外源基因的序列结构是影响外源基因在大肠杆菌中表达的重要因素,研究人员采用基于"外源基因全序列结构优化"的表达策略,研究了HIV-1gp120-801和霍乱毒素A亚单位(CTA-246)基因
大型燃煤电厂供热改造是火电行业转型的必然趋势.在当前我国火力发电厂中,纯凝汽式机组作为其中最为重要的运行设备之一,对火力发电厂的正常、稳定运行有着直接且深远的影响.
用单克隆抗体研究蛋白质折叠可望获得其他方法难以获得的信息,在研究体内新生肽甸的折叠中它更具有独特的优势.由于技术上的一些局限,这种方法仍未成熟与通用的方法.作者选择
在电力系统监测、控制与保护技术及智能化变电站快速发展的同时,智能化PMU、测控装置和数字化电能表等智能设备也得到了广泛应用,能够有效地改善电能利用率、提高供电效率。智能化变电站通过数字化电能表及合并单元构成电能计量系统,通过智能化PMU与测控装置构成电测计量装置,与传统变电站在计量结构与特性上有所不同,要求系统具有更为严格的计量准确性。但在实际应用中,即使数字化电能表、智能化PMU和测控装置均能满