论文部分内容阅读
背景帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种神经退行性疾病,常见于中老年人,也是最常见的突触核蛋白病之一,目前被认为是包括运动症状和非运动症状的多系统疾病。典型的运动症状包括静止性震颤、运动迟缓、肌强直及姿势步态障碍,又被称为“运动四主征”。非运动症状包括嗅觉障碍、自主神经功能障碍、睡眠障碍、认知功能障碍,又成为帕金森病的“非运动四主征”。这些多样的临床特征反映了PD患者在患病过程中神经化学和神经解剖学的广泛变化,不仅有黑质纹状体多巴胺的参与,含去甲肾上腺素能和5-羟色胺能脑干系统、胆碱能额叶及脑干区域等也参与其中。α-突触核蛋白(α-synuclein,路易小体的重要成分)分布与非运动症状密切相关。除了中枢神经系统,自主神经系统、外周神经系统也受累及,交感神经系统、副交感神经系统、唾液腺等器官也受累及。在非运动症状中,自主神经功能障碍主要以胃肠道的表现为主,且PD病人的胃肠道功能逐渐受到关注。大约30%的PD患者患有胃肠道功能障碍,便秘是PD胃肠道功能障碍最被认可的症状之一。相关文献报道,PD患者发生便秘的几率接近90%,且随着疾病的逐步发展,发病率也逐步上升。非运动症状(non-motor symptoms,NMS)在帕金森病患者发病的各个时期里均可出现,也可以在运动症状之前出现。非运动症状严重危害了PD患者的社会功能和生活质量,影响程度甚至超过了运动症状,对PD非运动症状的进行早期识别、及时治疗,从而能够及时诊断和改善帕金森病患者的生活质量显得非常重要。截止目前为止,PD的诊断主要依赖临床表现,神经病理学确诊只能用于尸检的研究。根据大量的研究表明,α-synuclein广泛分布于帕金森病人体内。不仅局限于中枢神经系统,路易小体(Lewy bodies,LB)在唾液腺、下颌下腺、肾上腺髓质、皮肤、心神经丛、盆腔神经丛、交感神经、及肠神经系统(enteric nervous system,ens)等也有发现。pd病早期可以出现各种不同的胃肠道症状,尤其是便秘、排便功能障碍、流涎、吞咽困难等,因此我们进一步推测α-突触核蛋白阳性包涵体于pd早期在肠神经系统内形成,因此在早期通过对结肠粘膜进行活检来进一步确诊pd的研究,这些研究极有可能在健在病人体内发现突触核蛋白相关的组织病理,从而有效的提高pd诊断的准确性。目的运用结肠镜对pd病人结肠粘膜进行活检,检测pd患者结肠粘膜下神经丛α-突触核蛋白阳性包涵体形成,探讨结肠粘膜下α-突触核蛋白阳性包涵体的存在是否有可能做为帕金森病早期诊断的生物学指标。方法1.本研究收集pd患者(病程<6个月)8例为pd1组,收集pd患者(病程≥6个月)10例为pd2组,以及正常对照组12例为nc组。收集pd患者的临床资料,按照纳入及排除标准,并且对pd患者进行updrsⅢ、hoehn&yahr分级量表评分。运用结肠镜活检术收集pd患者的结肠粘膜标本。2.采用免疫组化法和蛋白印迹法(westernblot)检测结肠粘膜下神经丛α-突触核蛋白阳性包涵体的表达。3.应用spss17.0统计软件分析,所得实验数据采用均数±标准差(x±s)来表示。应用单因素方差分析、bonferroni法或秩和检验,以p<0.05表示差异具有统计学意义。结果1.经免疫组化法检测,8例pd1组患者中有6例于结肠粘膜下神经丛内发现α-突触核蛋白阳性包涵体,10例pd2患者中有10例于结肠粘膜下检测到α-突触核蛋白阳性包涵体。健康对照组(nc组)内未发现α-突触核蛋白阳性包涵体。2.经westernblot法检测,nc组、pd1组、pd2组之间相比较,结肠粘膜下α-突触核蛋白表达水平随pd病程的延长逐渐上调,差异具有统计学意义,p<0.05。结论1.通过结肠镜对PD病人结肠粘膜进行活检,结肠粘膜下神经丛α-突触核蛋白阳体包涵体的表达,可能成为PD的早期诊断的生物学标志物。2.结肠粘膜下神经丛α-突触核蛋白的表达水平随着PD病程延长逐渐上调。