Brd4和SEC共同调控RNA聚合酶Ⅱ暂停的解除

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转录的调控过程影响着细胞的分化、基因表达等重要生命过程。近年来伴随着高通量等基因组学技术的发展,研究人员可以在全基因水平上研究基因转录的调控。真核基因的转录过程至少可以分为四个阶段:转录前起始复合物的组装、转录起始、转录延伸以及转录终止。随着高通量测序等技术的发展,生物学家对于转录调控的理解也发生了巨大变化。一直以来研究人员把研究转录调控的重点放在转录的起始,认为转录的起始过程才是转录的唯一限速步骤,然而越来越多的试验证据表明转录的延伸过程也是转录重要的调控限速步骤。在许多基因转录延伸过程中,RNA聚合酶Ⅱ在启动子附近会出现暂停的现象(RNA PolⅡ promoterproximal pausing),目前研究人员认为对这一过程的调控是转录延伸调控过程中非常关键的步骤,其对细胞分化、生长发育都具有重要意义。虽然目前对于RNAPolⅡ转录暂停的的详细分子机制还有争论,但是普遍认为:DISF和NELF这两种负性转录因子和RNA PolⅡ在启动子区的结合是PolⅡ暂停所必须的。PolⅡ暂停的释放需要P-TEFb的作用,大量证据表明Brd4和SEC都可以招募P-TEFb并调控转录延伸的过程,但是对于其详细分子机制目前并不清楚,而且目前用于研究RNA PolⅡ转录暂停释放分子机制的方法非常局限。1)我们通过ChIP-Seq方法发现了Brd4和SEC共同调控RNA PolⅡ转录暂停释放这一机理。2)我们在实验过程中发现了HMBA可以作为研究RNA PolⅡ暂停释放的药物模型。3)在HMBA药物模型的基础上我们分别在检测DNA,蛋白质水平上建立了ChIP-Silverstaining,LSEN细胞组分分离方法,可以更为便捷高效的研究RNA PolⅡ启动子区转录暂停释放的详细分子机制。
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