论文部分内容阅读
台湾青枣(Ziziphus mauritiana)原产于东南亚等地，是一种热带、亚热带常绿小乔木果树。90年代初，国内农业专家开始把青枣引入广东，经过10年多的迅速发展，现已大面积种植在华南地区，并且培育出多种优良品种。然而与之迅速发展不对称的是各品系种质资源的遗传差异信息所知甚少。本文运用RAPD分子标记方法对台湾青枣“蜜丝”、野生毛叶枣、“五千”、“大脆蜜”、“天蜜”、“新世纪”、“长丝蜜”、“高朗3号”、“翠蜜”和“天王蜜”10个品种进行遗传多样性分析，结合运用Popgenel.31、NTSYS—pc2.2等遗传分析软件，探讨青枣的遗传多样性及各品种的分类地位。主要结果如下：
1.RAPD扩增共有8对引物能够扩增出多态性条带，合计69个多态位点，多态位点百分数(P)为71.88％。其中台湾青枣10个品种的总遗传多样性指数(Ht)和香浓多样性指数(I)分别0.2449和0.3671，品种间遗传多样性指数(Dst)以及遗传分化系数(Gst)分别为0.1332、0.5439，基因流(Nm)为0.4193，结果表明RAPD分子标记在台湾青枣品种间的差异明显，显示出较高的遗传分化，是一种研究青枣种质资源遗传多样性的有效手段。
2.UPMGA遗传聚类分析表明，10个品种可分为两个大类，其中“长丝蜜”、“蜜丝”、“大脆蜜”、“新世纪”、“翠蜜”分为一类，其他5个品种分为另一类，处于同一类的品种间具有相近的果型指数及遗传背景。以野生毛叶枣为对照，不同栽培品种与其遗传距离大小依次为：“翠蜜”>“新世纪”>“长丝蜜”>“蜜丝”>“天蜜”>“大脆蜜”>“高朗3号”>“五千”>“天王蜜”。结果大致揭示出台湾青枣种质进化过程，与野生毛叶枣遗传相似性较高的“天王蜜”、“五千”相对较为原始，其它更多优质青枣品种由这些品种改良培育而来。同时聚类分析结果揭示出各品种遗传亲缘关系远近，为寻找“大脆蜜”等新引品种的亲本来源提供了一定的理论依据和指导意义。
3.PAGE胶电泳结果表明野生毛叶枣RAPD扩增产物具备独立的特异性位点，能够清晰明显地与其他9个人工培育品种所区别，是一种成功识别野生毛叶枣的分子手段，为结合多种方法探究台湾青枣的人工驯化过程提供了很好的研究素材。
4.本文采用改良CTAB法成功提取了台湾青枣的基因组DNA，所获DNA完整，PCR扩增结果稳定可靠，并分析了影响RAPD反应的主要因素，优化了青枣RAPD反应体系，确定了反应的最适退火温度，这些改良对类似物种的遗传分析提供了很好的借鉴。