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醇酰基转移酶(Alcohol acvltransferase，AAT)是生物体内酯类挥发性成分合成的关键酶。前期研究发现，水杨酸(salicvlic acid，SA)、乙烯利(Ethephon，ETH)和茉莉酸甲酯(methyI iasInonate，MeJA)可以不同程度的诱导节果果实中醇酰基转移酶基因(MdAAT2)的表达，这表明该基因可能参与了对胁迫信号的响应。目前，对醇酰基转移酶基因的研究主要集中在果实和花香气合成调控方面，其转录调控的机制及上游转录因子尚不清楚。本试验通过生物信息学技术，筛选并克隆了六个胁迫相关的转录因子(MdMYB1，MdMYB2,MdMYB6，MdERFl，MdERF2和WRKY)，通过半定量RT-PCR技术分析了这些转录因子在金帅节果不同组织、发育阶段以及不同信号物质诱导后的表达特性，分析了其与MdAAT2基因表达的相关性。主要结果如下：1、利用PLANTCARE等相关数据库，对MdAAT2启动子的顺式元件进行了分析。研究发现，MdAAT2启动子区域存在两个水杨酸响应元件W-box和一个茉莉酸甲酯响应元件TGACG-motif，分别位于转录起始位点上游-66lbp、-1130 bp和-1129bP)处。结合同源性分析，在金帅苹果中克隆了六个候选的转录因子：MdMYBl (GU013684)、MdMYB2(GU013681)、MdMYB6(GU013682)、MdERF1(AB288347)、MdERF2(AB288348)和WRKY(GUO13683)。2、通过RT-PCR技术分析了候选转录因子和MdAAT2在节果果实和花器官中的表达特性。研究发现六个候选转录因子在柱头中均有显著表达，其中MdERF1和MdERF2在果实和花器官中均有不同程度的表达。序列分析发现MdAAT2启动子中存在两个与花粉特异表达有关的元件，POLLENILELAT52，分别位于-82bp和-882bp处。这表明所分析的转录因子可能通过调控功能基因的表达或与MdAAT2相互作用，参与果实和花器官中挥发性酯类成分的合成。3、通过RT-PCR技术分析了MdAAT2和候选转录因子在果实发育阶段的表达特性。相关性分析发现WRKY、MdMYB6与MdAAT2的表达模式相关性不显著，而MdMYB1、MdMYB2、MdERFl、MdERF2与MdAAT2表达特性具有显著的相关性。这表明WRKY和MdMYB6可能不参与对MdAAT2的转录调控，而MdMYBl、MdMYB2、MdERFl三个转录因子可能通过调控MdAAT2的表达，参与了挥发性酯类物质的代谢。4、水杨酸(2.0mM)处理发现,MdERFl与MdAAT2的表达模式具有极显著的相关性，MdMYB6与MdAAT2也具有显著的相关性。这表明MdERFl和MdMYB6可能在水杨酸信号转导途径中，调控了MdAAT2的表达。5、乙烯利(2.0mM)处理发现,MdMYB1、MdMYB6和MdAAT2的表达模式具有显著的相关性。这表明MdMYBl、MdMYB6很可能参与乙烯信号转导途径，作为MdAAT2表达的激活因子。6、茉莉酸甲酯(2.0mM)处理发现，MdMYB2、MdERF2与MdAAT2的表达呈显著的相关性，这表明MdMYB2、MdERF2可能在茉莉酸甲酯信号转导途径中，调控了MdAAT2的表达。7、通过序列分析发现，MdAAT2启动子含有CAAT盒子、CCAAT盒子和许多MYB转录因子结合元件，而MdMYBl和MdMYB6转录因子具有CAAT盒子和CCAAT盒子的结合位点。结合相关性分析的结果，我们推测MdMYBl和MdMYB6可能是调控MdAAT2表达的上游转录因子，参与了对胁迫信号的响应。