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目的:研究胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor I，IGF-I)对大鼠肾脏髓袢升支粗段(TAL)管周膜10pS氯通道的作用及信号转导调控机制。
方法:采用细胞贴附式膜片钳技术研究肾脏髓袢升支粗段管周膜氯离子通道(氯通道)。观察IGF-I对TAL管周膜10pS氯通道的作用，采用信号转导通路中相关酶的激动剂或抑制剂研究IGF-I对氯通道的调控机制。
结果:
1、加入IGF-I可以抑制10pS氯通道的活性，NPo从1.00±0.36降到0.25±0.05(n=4，P<0.05)，洗脱后通道活性恢复至0.81±0.20(n=4，P<0.05)，说明IGF-I可以抑制10pS氯通道的活性，而且这种抑制作用是可逆的。
2、在cell-attached patch时，依次加入50nmol/L的IGF-I，使其浓度达到50、100、150、200、250、300nmol/L，氯通道活性逐渐降低，呈剂量依赖性。
3、在cell-attached patch时，先加入5μmol/L磷脂酶A2(PLA2)的抑制剂AACOCF3，随后再如入200nmol/L的IGF-I，结果表明，AACOCF3对氯通道的活性无显著影响，通道活性NPo从1.37±0.42增加到1.45±0.33(n=5，P>0.05)，而再加入IGF-I后其抑制作用未出现，NPo为1.45±0.39(n=5，P>0.05)。由此推断PLA2-花生四烯酸(PLA2-AA)信号转导途径参与IGF-I抑制管周膜氯通道的作用。
4、先加入5μmol/L环氧合酶(COX)抑制剂indomethacin，随后再加入200nmol/L IGF-I，结果表明，indomethacin对通道的活性没有明显影响，NPo从1.07±0.33增加到1.09±0.23(n=7，P>0.05)，而再加入IGF-I后其抑制作用未出现，NPo为1.08±0.25(n=7，P>0.05)。由此推断PLA2-AA信号转导途径经COX转化途径参与IGF-I抑制管周膜氯通道的作用。
5、先加入5μmol/L P450单氧化酶抑制剂17-0DYA，随后再加入200nmol/LIGF-I，结果表明，加入17-ODYA通道的活性无显著增加，NPo从0.82+0.16增加到1.00±0.25(n=5，P>0.05)，而再加入IGF-I后其抑制作用未出现，NPoNPo为0.79±0.19(n=5，P>0.05)。由此推断PLA2-AA信号转导途径经P450单氧化酶转化途径参与IGF-I抑制管周膜氯通道的作用。
上述实验结果表明，PLA2-AA信号转导途径经COX及P450单氧化酶两条转化途径参与IGF-I抑制管周膜氯通道的作用。
6、先加入5μmol/L磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122，随后再加入200nmol/LIGF-I，结果表明，U73122对通道的活性无显著影响，NPo从1.19±0.30增加到1.41±0.32(n=6，P>0.05)，再加入IGF-I后其抑制作用仍然出现，NPo降到0.21+0.13(n=6，P<0.01)，洗脱后通道活性有所恢复，NPo恢复到0.91+0.02( n=3，P<0.05)。由此推断PLC-PKC信号转导途径不参与IGF-I抑制管周膜氯通道的作用。
7、先加入100μmol/L PKA激动剂8-Bro-cAMP，随后再加入200nmol/L IGF-I，观察氯通道的活性是否发生变化。结果表明，8-Bro-cAMP对通道的活性没有明显影响，NPo从1.10±0.18增加到1.10±0，15(n=6，P>0.05)，而加入IGF-I其抑制作用未出现，NPo为1.04±0.10(n=6，P>0.05)。由此推断cAMP-PKA信号转导途径不参与IGF-I抑制管周膜氯通道的作用。
结论:
1、IGF-I抑制大鼠肾脏髓袢升支粗段管周膜10pS氯通道的活性；
2、PLA2-AA信号转导途径经COX及P450单氧化酶两条转化途径参与IGF-I抑制髓袢升支粗段管周膜10pS氯通道的作用。