生殖道沙眼衣原体血清分型研究

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目的:  通过建立一种快速、高特异性的适用于临床沙眼衣原体血清分型及其流行病学调查的实验室方法,了解生殖道沙眼衣原体血清型分布及其ompA基因变异情况。  方法:  (1)收集2011年12月~2013年3月首都医科大学附属北京同仁医院泌尿门诊及妇科门诊疑似生殖道沙眼衣原体感染患者送检的生殖道分泌物标本923例,使用沙眼衣原体检测试剂盒对其进行初筛。  (2)将初筛后获得的阳性标本使用巢式PCR方法扩增沙眼衣原体ompA基因并进行测序,测序产物使用PubMed中的BLAST进行血清分型,并使用DNAstar软件中的MegAlign程序对临床株沙眼衣原体的ompA基因与标准序列进行比对,分析各血清型沙眼衣原体ompA基因的变异情况,并建立进化树分析各血清型沙眼衣原体的同源性。  结果:  (1)923例标本中包括男性标本399例,占43.23%(399/923);女性标本524例,占56.77%(524/923),共检测出沙眼衣原体阳性的标本有71例,阳性率为7.69%(71/923)。沙眼衣原体阳性标本中男性标本有59例,占83.10%(59/71),就诊患者平均年龄为31.7岁;女性标本12例,占16.90%(12/71),患者平均年龄为31.4岁。其中男性患者生殖道沙眼衣原体感染阳性率为14.79%(59/399),女性患者感染阳性率为2.29%(12/524)。  (2)71例沙眼衣原体阳性标本均成功扩增出其ompA基因,并进行血清型分型。其中F型20例(28.2%),E型18例(25.4%),D型15例(21.1%),G型7例(9.9%),H型、J型各4例(5.6%),K型3例(4.2%),未检测出Ba、Da、 Ia、L2a等血清变异型及A~C型、L1~L3型,无混合血清型感染。  (3)临床标本中沙眼衣原体血清型D型ompA基因存在突变最多,且多为有意义突变,其次为血清型G型,J型、K型与H型无有意义碱基突变。  结论:  (1)于我院就诊的疑似生殖道沙眼衣原体感染患者的沙眼衣原体感染总阳性率为7.69%(71/923),其中男性患者感染阳性率为14.79%(59/399),女性患者感染阳性率为2.29%(12/524)。  (2)在生殖道沙眼衣原体感染患者中沙眼衣原体血清型分布仍以血清型F、E、D型为主(占74.7%),未检测出Ba、Da、 Ia、L2a等血清变异型及A~C型、L1~L3型,无混合血清型感染。与目前大多数文献报道一致。  (3)沙眼衣原体各血清型中以血清型D型变异最多,其次为G型,而血清型E型、F型、J型、K型、H型的ompA基因高度保守。  (4)巢式PCR扩增沙眼衣原体ompA基因并测序可以对临床标本中的沙眼衣原体进行直接血清分型,并且其快速、高特异性的优点可以在临床中推广。
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