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狂犬病病毒（rabies virus，RV）是一种能引起人和动物高度致死性疾病的嗜神经病毒，属弹状病毒科狂犬病毒属，基因组从3’端至5’端依次排列5种结构蛋白，即核蛋白(N)、基质蛋白(M)、磷酸蛋白(P)、糖蛋白(G)和转录酶蛋白(L)。其中基质蛋白为狂犬病病毒最小的结构蛋白，共202个氨基酸，占病毒总蛋白的11％。M蛋白能够连接核衣壳和病毒膜，在l-72位氨基酸残基之间有一个抗原决定蔟，该部位与狂犬病病毒的免疫反应有关。另外，由于糖蛋白的羧基端插入其中，因此它可以直接影响糖蛋白在病毒包膜表面的构型，在病毒形态形成中都起着重要作用，并且平衡、调节病毒的转录与复制。
本研究第一部分对狂犬病病毒M基因进行了克隆与原核表达，并为了提高其表达量对其进行了密码子偏嗜性改造。以狂犬病病毒全长基因组质粒pHEP-3.0为模板，通过PCR得到M基因，与优化序列MN分别双酶切后定向克隆至原核表达载体pET-32a，构建重组质粒pET-M、pETMN，鉴定并转化至表达菌BL21(DE3)后获得了高效表达M蛋白的重组子。大量诱导表达后纯化蛋白并采用MS/MS质谱鉴定，为制备狂犬病病毒M蛋白的单克隆抗体提供基础。
第二部分内容以获得的M蛋白为抗原制备单克隆抗体。纯化的蛋白经与弗氏完全佐剂及弗氏不完全佐剂乳化后按间隔14 d的免疫程序进行免疫。三免后采用间接ELISA法测定抗体水平并继续免疫。融合前用未乳化的抗原加强免疫，3d后取脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。采用间接ELISA法检测杂交瘤细胞上清，将阳性孔内的细胞经有限稀释法进行亚克隆3次或以上，直至筛选出稳定分泌特异性单抗的单个细胞株。通过间接ELISA、竞争ELISA法鉴定后发现其与多个犬常见病毒无交叉反应。利用获得的细胞株制备腹水后发现，腹水稀释50000-100 000倍其OD450仍在1.0以上，效果良好。
本研究成功表达了狂犬病病毒基质蛋白，建立了间接ELISA检测体系筛选杂交瘤细胞的方法，并利用此蛋白免疫制备鼠源性单克隆抗体，为进一步开展此单克隆抗体的应用，深入对狂犬病病毒基质蛋白的研究提供了方便。