钙结合蛋白D-9K的表达、纯化及其抗体的制备

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为制备抗钙结合蛋白(Cabp)D-9K单克隆抗体和探索CabpD-9K在着床中的作用机理,首先必须分离纯化得到足够量的CabpD-9K.为此,拟采用基因重组技术制备CabpD-9K.该研究构建了pBV220-CabpD-9K-βhCG表达质粒,在大肠杆菌TG-1中表达了CabpD-9K-βhCG融合蛋白.在AKTA explorer(Pharmacia)中低压液相分析系统上,利用RESOUCERPC(反向层析柱)纯化获得了融合蛋白.为检测该抗原的免疫反应,首先用弛化的融合蛋白免疫C57BL小鼠,制备了多克隆的抗体.用同样的融合蛋白免疫Bal b/c小鼠,制备了单克隆抗体.该文成果将在"细胞生物学杂志"2000年第3期发表.研究人员在大肠杆菌TG-1中表达和纯化得到CabpD-9K-βhCG融合蛋白,并制备了抗CabpD-9K单克隆抗体,这将为进一步研究钙结合蛋白D-9K在着床中的功能和子宫内膜Ca<2+>信号转导奠定基础.
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