基于p38 MAPK信号通路对电针刺改善创伤大鼠免疫功能机制的研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wellstudyc
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目的:在手术创伤后,电针刺是否通过p38 MAPK信号通路调节免疫反应的机制尚不清楚,因此本实验研究旨在进一步探讨电针刺是否通过p38 MAPK信号通路调节免疫系统的功能。  方法:按随机数字法将96只大鼠分为正常对照组(Control组,C组,n=24)、创伤组(Trauma组,T组,n=24),创伤+电针刺组(T+EA组,TE组,n=24)、和创伤+假电针刺组(T+sham EA组,TS组,n=24)。采用手术创伤致术后免疫抑制方法造模,大鼠术前12h禁食、自由饮水,经腹腔注射戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉后,暴露腹部,75%酒精消毒,铺无菌巾取腹部正中切口,切开腹膜,暴露术野,行腹腔探查术,5分钟后,逐层缝合,关闭腹腔。待麻醉苏醒后30min,选取大鼠双侧后肢足阳明胃经上的“足三里”、“阑尾”穴进行电针刺激,持续30min,每日1次,共5次。于术后1、3、5天处死大鼠,无菌取脾。应用流式细胞仪检测脾脏组织CD4+和CD8+T淋巴细胞含量,计算R(CD4+/CD8+)值;应用Western blot,荧光定量PCR检测创伤大鼠脾脏组织p38,p-p38,IL-2,IFN-γ,Bcl-2,Bax的表达情况。  结果:通过流式细胞仪检测,与C组比较,T组和TE组创伤术后3天R值均有显著降低(P<0.001);未加p38阻断剂SB203580, T组与TE组比较,R值明显降低(P<0.01);加与未加p38阻断剂SB203580, T组和TE组分别组内比较,R值均有显著降低(P<0.05)。通过Western blot,荧光定量PCR检测,与C组比较,T组和TE组p-p38, IL-2,IFN-γ和Bcl-2的表达,在蛋白水平及mRNA水平均有显著降低(P<0.001);未加阻断剂SB203580,与T组相比较,TE组p-p38, IL-2,IFN-γ和Bcl-2在蛋白水平,mRNA水平表达均明显升高,而Bax的表达显著降低(P<0.01);在加与不加P38阻断剂,T组、TE组组内比较,p-p38, IL-2,IFN-γ和Bcl-2表达均有显著升高(P<0.05)。加与不加P38阻断剂,与T组比较, TS组上述指标表达均无显著差别。  结论:电针刺激活了p38 MAPK的活性,进而恢复了创伤大鼠CD4+/CD8+T淋巴细胞的体内平衡;电针刺在恢复T淋巴细胞亚群平衡和细胞因子表达的过程中,通过p38 MAPK信号通路,调节Bcl-2/Bax表达进而发挥了重要的作用。所以,p38 MAPK信号通路可能是电针刺调节创伤后免疫功能抑制的机制之一。
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