【摘 要】
：
奶牛子宫内膜炎是引起奶牛发生不孕症的最主要原因之一,可引起增加人工授精配种次数,延长奶牛的受孕间隔,降低奶牛妊娠率和受孕率等重大问题,往往给养殖户带来很大的经济损失
论文部分内容阅读
奶牛子宫内膜炎是引起奶牛发生不孕症的最主要原因之一,可引起增加人工授精配种次数,延长奶牛的受孕间隔,降低奶牛妊娠率和受孕率等重大问题,往往给养殖户带来很大的经济损失。病原菌感染是引起奶牛子宫内膜炎的主要原因之一其中以大肠杆菌为主,大肠杆菌进入机体后可释放产生大量LPS,引起奶牛子宫发生严重炎症反应,引发子宫内膜炎。常用的中药红花,常用于奶牛子宫内膜炎治疗,具有活血通经、祛瘀止痛的作用,而羟基红花黄色素A(HYSA)是中药红花的最主要水溶性有效成分之一。因此,本研究为了探讨HSYA对LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎性损伤的干预作用及其分子机制,开展了以下研究:1.通过胶原蛋白酶和胰蛋白酶消化法分离、培养奶牛子宫内膜上皮细胞,再采用差速消化法纯化得到上皮细胞,免疫组化法鉴定了奶牛子宫内膜上皮细胞。成功建立了奶牛子宫内膜上皮细胞的分离培养方法,为后续研究奠定了研究基础。2.通过MTT法检测不同浓度LPS对奶牛子宫内膜上皮细胞体外增殖的影响,结果表明:1μg/mL LPS作用24h时促进细胞增殖作用最为明显(P<0.05),ELISA检测结果表明,1μg/m L LPS可诱导奶牛子宫内膜上皮细胞IL-1β和TNF-?分泌量显著升高(P<0.05),确定LPS的作用浓度为1μg/mL,作用时间是24h。3.以1μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/m L、20.0μg/m L、40.0μg/mL、80.0μg/m L的HSYA作用24h后,MTT法检测HSYA对奶牛子宫上皮细胞增殖的影响。结果表明:HSYA对奶牛子宫内膜上皮细胞增殖无明显毒性,且促进其增殖。因此,确定HSYA作用浓度分别为80μg/m L(高剂量组)、20μg/m L(中剂量组)、5μg/m L(低剂量组)。4.分别用高、中、低剂量的HSYA作用奶牛子宫内膜上皮细胞24hr后,采用real-time PCR法检测上皮细胞中TLR4、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αm RNA表达量。结果表明,LPS组奶牛子宫内膜上皮细胞TLR4和细胞因子IL-1β、1L-6、IL-8、TNF-α、mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05),经5、20、80μg/m L的HSYA作用奶牛子宫内上皮细胞24hr后,各组细胞TLR4和细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-8和1L-6 mRNA表达量均显著降低(P<0.05),说明HSYA可通过抑制LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞TLR4和相关炎性细胞因子mRNA表达起抗炎作用。5.通过Western-blot检测奶牛子宫内膜上皮细胞中NF-κB、MAPKs信号通路关键蛋白p-IκBα/IκBα、p-p65/p65蛋白以及P-JNK、p-pP38、p-ERK1/ERK2的表达变化,确定HYSA对LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎性损伤的细胞信号通路的作用,确定其分子调控机制。结果表明:LPS可刺激奶牛子宫内膜上皮细胞的p-IκB?/IκB?和p-p65/p65相对比率均显著升高(P<0.05),同时还刺激p-JNK、p-ERK1/2、p-p38蛋白表达水平显著升高(P<0.05),即LPS可通过诱导NF-?B和MAPK信号通路的激活,诱导奶牛子宫内膜上皮细胞炎性损伤;而经过高、中、低剂量的HSYA作用后,奶牛子宫内膜上皮细胞的p-IκB?/IκB?和p-p65/p65相对比率显著降低(P<0.05),与LPS组相比,除低剂量HSYA组上皮细胞的p38磷酸化水差异不显著(P>0.05)外,中、高剂量的HSYA处理后细胞的JNK、ERK1/2、P38磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。因此,HSYA可通过抑制NF-?B和MAPK信号通路的激活,抑制下游炎性细胞因子表达,从而达到抗炎作用。
其他文献
摘要： 在思想品德学科中，除了传统的课堂教学形式以外，课外活动也是教师开展思想品德教学活动的重要形式。与课堂教学的间接知识传授相比，在课外活动中，学生能够获得第一手资料，获得直观的感受和体验，因此，通过课外活动，可以促使学生掌握很多课堂教学中无法获得的知识，提高素质。本文简要阐述了思想品德课外活动课程的重要作用，分析了有效开展课外活动需要注意的问题。 关键词： 思想品德课外活动作用实施策略
作者对宜春钽铌矿锂云母浮选生产过程进行了十五次检测,在此基础上用最小二乘法求数据的曲线拟合,建立起锂云母浮选的数学模型。对影响锂云母浮选的诸因素作出了定量的分析,
1987年2月第一个星期,在美国迈阿密州召开的炸药和爆破技术会议上,推出了一个电子雷管样品。据称,这种雷管能使爆破精确定时,c.科尼亚博士在会议上指出了这项科研成果的重要
地理教学策略是指建立在一定理论基础之上，为实现某种教学目标而制订的教学实施的总体方案。教学策略的设计是最能体现教学设计创造性的环节。新课程理念下的高中地理教学，教师的教学策略应发生转变，由重知识传授向重学生发展转变，由重教师“教”向重学生“学”转变，由重结果向重过程转变，由统一规格教育向差异性教育转变。因此，重视教学设计策略的研究，能使事半功倍。 一、教学氛围愉悦化策略 高中地理新课程倡导学生
摘要： 初中是学生接触物理的起始阶段，对以后的物理学习有着重大的影响。本文阐述了在初中物理教学中培养学生探究学习能力的具体方法。 关键词： 初中物理教学探究能力培养方法 一、新型的教育模式的塑造 理念是行动的灵魂，有什么样的理念，就有什么样的行动。要培养学生的探究能力，首先要走出传统教学观念的藩篱，建构新型教学理念。美国心理学家罗杰斯认为：“教学不是用于从外部控制人的行为，而是应用于创造
摘要： 在高中物理教学中实施实验教学，需要在思想层面学习经典理论、培养学生的探究精神，在操作层面探索有效的实验学习方式，在课外层面开展各种形式的课外实验，在评价层面改变评价方式，以培养学生实验能力为重点。 关键词： 高中物理实验教学思想层面操作层面课外层面评价层面 实验对物理学科的发展有着至关重要的作用，所以物理学科的教学应该侧重于实验教学，但是目前，由于一些教师对实验的重要性认识不足，加
摘要： 在初中物理教学过程中，教师可以利用人格魅力、物理实验、物理与实践生活的联系、总结口诀、适当奖励等措施提高学生物理学习的兴趣。 关键词： 初中物理教学学习兴趣培养策略 物理学是一门非常重要的学科，它探究一切物质的组成及运动规律，揭示它们之间的联系和各种运动之间的关系。作为自然科学的一门重要基础科学，物理历来是人类物质文明发展的基础和动力，同时也是人类追求真理、探索未知世界奥秘的有力工
1.重视备课。 教师在上课前必须备课，备好课才能上好课。每次教研活动，本组老师共同探讨一些有价值的问题，然后总结。教学重点章节时，大家一起商讨课堂教学的引入、实验的开展、如何运用课件、应解决的难点等。上课时，注重教给学生基础知识，培养基本的探究技能和解决问题的能力。有必要时，在重点章节的教学中可以添加一至两节复习课。 2.全面落实教学目标。 首先，三维教学目标的全面落实。对基础知识的讲解要透
创新是指突破原有事实框架，对事物的现象和本质进行分析、综合、推理、想象，激发新的灵感，发现新的规律，从而提出新的知识和新的方法，创造出新产品、新工艺、新成果。而创新教育就是以培养学生的确创新精神和创新能力为价值取向的教育。培养创造型人才是学校教育的目标。 这一目标的实现有赖于在学校各学科教育教学活动中，推行创造性教育，培养学生的创新意识、创造性思维和创新实践能力，使他们想创新、敢创新、会创新。
摘要： 新课程改革对化学课堂教学提出了更高要求，本文从转变教育观念，重塑教师形象；改进教学方法，开展探究性教学；指导学习方法，组织学生自主学习三个方面对新课程理念下的化学教学方式进行了探讨。 关键词： 新课标化学教学教学方式转变 新课程改革的教学理念强调“基础教育的任务不仅仅是传授知识，更重要的是改变学生的学习方式，由被动的接受学习，转变为主动的探究学习”。倡导“自主、合作、探究的学习方式