【摘 要】
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目的:1、建立HPV16 E6E7基因转染的胎儿宫颈上皮永生化细胞系,为体外研究宫颈上皮HPV感染及其癌变机制提供模型.2、研究雌、孕激素在HPV感染、永生化细胞恶性转化、癌进展过
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目的:1、建立HPV16 E6E7基因转染的胎儿宫颈上皮永生化细胞系,为体外研究宫颈上皮HPV感染及其癌变机制提供模型.2、研究雌、孕激素在HPV感染、永生化细胞恶性转化、癌进展过程中的作用.3、研究小干扰RNA(Small interferingRNA,siRNA)表达载体对宫颈癌细胞中HPV16 E6E7基因表达的长期影响,为HPV感染及HPV阳性宫颈癌的治疗探索新方法.结论:1、转染HPV16 E6E7基因能使胎儿宫颈上皮细胞永生化,永生化细胞仍维持上皮细胞表型,染色体核型发生明显变化,但尚未完全恶性转化.2、雌二醇、孕酮在HPV感染、永生化细胞恶性转化和癌进展过程中起重要作用.雌二醇能促进NIH 3T3细胞HPV感染和宫颈癌细胞中HPV病毒癌基因表达,生理浓度的雌二醇(≤1.0 μ M)促进宫颈癌细胞增殖生长;低浓度的孕酮能抑制NIH 3T3细胞HPV感染,较高浓度的孕酮能促进NIH 3T3细胞HPV感染;孕酮能促进永生化胎儿宫颈上皮细胞中HPV16 E7mRNA表达.3、HPV16 E6Ahairpin siRNA表达载体稳定转染人宫颈癌SiHa细胞后,可以在细胞内长期表达siRNA,有效抑制细胞内HPV16 E6、E7基因的表达,抑制细胞生长,诱导细胞凋亡,降低细胞侵袭能力、软琼脂集落形成能力,抑制细胞在裸鼠体内成瘤能力,作用持续达4个月以上.
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