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长期重度哮喘气道中，存在着气道结构的改变即气道重构的现象。平滑肌增生肥厚和气道壁细胞外基质的异常沉积等是气道重构中的主要结构改变。气道平滑肌与周围环境中细胞外基质（Extraellular matrix,ECM）之间的相互作用影响以及与其它因素如炎症因子、生长因子的复杂交错作用很可能进一步参与了哮喘中的气道重构及气道高反应。许多体外研究实验发现ECM成分不仅能调节体外培养的气道平滑肌细胞（Airway smooth muscle cells,ASMCs）的合成、增生、迁移，而且也能通过生物、化学信号途径影响平滑肌的表性和功能。并且来自于哮喘患者的气道平滑肌细胞表达细胞外基质成分也与正常健康者不同。但ECM异常沉积如何参与调节气道平滑肌的功能以及他们与气道高反应、气道重构的确定关系至今还不清楚。 本文主要是研究层粘蛋白（Laminin,LN）、纤维连接蛋白（Fibronectin,FN）、I型胶原（Collagen I,ColI）三种不同ECM蛋白对血小板生长因子（Platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB）诱导的大鼠ASMCs生物力学特性变化的影响。这为明确哮喘中气道组织重构、炎症反应与气道高反应之间的相互作用，提供了指导和借鉴意义。 本文具体的研究内容分为如下几个部分： 1.大鼠ASMCs的原代培养及鉴定：本实验中采用了组织块贴壁法培养了原代的ASMCs。相差显微观察第三代的ASMCs表现“波峰－波谷”的生长特征。用免疫组织化学的方法对ASMCs的sm-α-actin进行染色鉴定，发现所培养的ASMCs阳性表达α-actin在95％以上，证明所培养的ASMCs纯度较高。 2.PDGF-BB诱导下不同细胞外基质成分对ASMCs形态的影响：采用显微图像方法观测细胞形态和宽长比。结果发现：相比较不含PDGF-BB的无血清培养基，在有PDGF-BB的培养条件下，ASMCs形态总体上变细变长，细胞长轴明显延长，即细胞宽长比减小，但附着在LN上的ASMCs比附着在ColI或FN上的细胞宽长比相对要大（P<0.01）。 3.PDGF-BB诱导下不同细胞外基质成分对ASMCs力学特性的影响：采用光学磁微粒扭转细胞测量方法（OMTC）测量细胞受KCl或组胺（Histamine）刺激时的收缩反应。结果发现：ASMCs对KCl刺激的收缩响应随培养时间增加而增加（P<0.01），但不受ECM蛋白成分的影响。而在有PDGF-BB的培养条件下，ASMCs对KCl或Histamine刺激的收缩响应总体上随培养时间呈下降趋势（P<0.05或P<0.01），但附着在LN上的ASMCs收缩响应下降程度相对较小。 本文研究表明：ASMCs受PDGF-BB作用时，其形态和收缩性的变化与不同ECM蛋白成分有关。研究发现ECM蛋白成分对PDGF-BB诱导的ASMCs形态和收缩性变化的差异性影响，对于深入认识基质蛋白、炎症因子与气道平滑肌细胞的相互作用及其与哮喘病理生理机制的关系具有重要意义。