青海高原宽鳞大孔菌液态培养及胞外多糖生物活性研究

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宽鳞大孔菌[Favolus squamosus(Huds.ex Fr.)Ames]又名老木菌、宽鳞棱孔菌、鳞盖大孔菌、磷拟多孔菌、宽磷多孔菌等。隶属于担子菌门(Basidiomycota)、担子菌纲(Basidiomycetes)、多孔菌目(Polyporales)、多孔菌科(Polyporaceae)、大孔菌属(Boletus)。其子实体肥厚味道鲜美,是一种具备较高开发价值和生物学活性的新型食用菌。本文选用青海宽鳞大孔菌为研究对象,对其液态发酵工艺、发酵动力学、胞外多糖抑菌作用以及胞外多糖对小白鼠的记忆力、抗疲劳、抗缺氧作用进行了研究,研究结果如下:1宽鳞大孔菌液态发酵营养条件及发酵工艺的研究1.1对影响生物量营养条件及发酵工艺的研究通过单因子和正交试验,确定了宽鳞大孔菌菌丝球生物量较佳的发酵培养工艺,即以营养条件为蔗糖(Sucrose)浓度3%,牛肉膏(Beef extract)浓度0.1%,磷酸二氢钾(KH2PO4)浓度0.3%,硫酸镁(Mg SO4·7H2O)浓度0.15%,发酵工艺条件为装液量120ml/250ml,温度27℃,摇床转速150r/min,玻璃珠数15颗,接种量4%,p H值7,培养6d,在此工艺时生物量较高,达到0.463g/100ml。1.2对影响胞外多糖产量营养条件及发酵工艺的研究通过单因子和正交试验,确定了宽鳞大孔菌胞外多糖产量较佳的发酵培养工艺,即以营养条件为乳糖(Lactose)浓度3%,蛋白胨(Peptone)浓度0.1%,磷酸二氢钾(KH2PO4)浓度0.3%,硫酸镁(Mg SO4·7H2O)浓度0.15%,发酵工艺条件为装液量120ml/250ml,温度27℃,摇床转速160r/min,玻璃珠数15颗,接种量3%,p H值8,培养6d,在此工艺时胞外多糖产量较高,达到0.517g/100ml。2宽鳞大孔菌发酵动力学研究发酵动力学研究结果表明,发酵液吸光度值、胞外多糖产量、生物量、菌丝球直径随着发酵时间的持续而增加,p H值逐渐减小。发酵到第7d时各值处于稳定,因此第7d是发酵终点。3宽鳞大孔菌胞外多糖抑菌活性的研究抑菌试验结果表明胞外多糖对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、小麦根腐菌、尖刀镰刀菌、红色面包霉、酵母菌的抑制率随着浓度的增加而增加;多糖对4种细菌的抑制作用受p H值影响不大,有较强的酸碱耐受范围。对4种真菌的抑菌率因p H值的改变而改变。4宽鳞大孔菌胞外多糖提高记忆力、抗疲劳、抗缺氧试验试验结果表明,胞外多糖对提高小白鼠记忆力、抗疲劳、抗缺氧能力有显著的作用:1.169g/kg·d多糖剂量组对缩短小白鼠跑迷宫时间显著影响;0.500g/kg·d、0.835g/kg·d、1.169g/kg·d多糖剂量组对延长小白鼠负重游泳时间效果显著;0.835g/kg·d、1.169g/kg·d多糖剂量组对提高小白鼠抗缺氧作用分别达到差异显著/极显著水平;喂养胞外多糖的各剂量组对小白鼠肝脏指数的影响均不显著,说明其多糖对小白鼠肝脏无刺激和无毒副作用,因此开发这一新型食用菌具有积极意义。
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