论文部分内容阅读
目的:CD4+CD25+T调节细胞(CD4+CD25+regulatory T cell,Treg)是一种表达白细胞介素2(IL-2)受体a链(CD25)的CD4+T细胞。近年来,CD4+CD25+T调节细胞已成为自身免疫、肿瘤免疫、移植免疫等领域的研究热点。CD4+CD25+Treg可能参与自身免疫性疾病、肿瘤的发病。本研究在于探讨CD4+CD25+Treg与血液系统疾病发病的关系,以及治疗过程中CD4+CD25+Treg的变化。
方法:本研究的研究对象包括83例初治血液病和20名健康正常人。83例患者包括特发性血小板减少性紫癜(ITP)30例,其中男性8例,女性22例),年龄14~59岁(中位年龄34岁);自身免疫性溶血性贫血(AIHA)20例,其中男性4例,女性16例,年龄15~63岁(中位年龄32岁);再生障碍性贫血(AA)18例,其中慢性再障(CAA)14例(男6例,女8例),急性再障4例(男2例,女2例),年龄14~59岁,平均35.8岁;骨髓增生异常综合征(MDS)15例(男7例,女8例),年龄21~63岁,中位年龄41岁,分为难治性贫血(RA)8例,环形铁粒幼细胞性难治性贫血(RAS)1例,难治性贫血伴原始细胞增多(RAEB)5例,难治性贫血伴原始细胞增多转变型(RAEB-t)1例。采用流式细胞术(FCM)检测ITP、AIHA、AA、MDS及正常对照组的CD4+CD25+Treg、CD3+T细胞、CD4+T细胞表达情况及CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比值。部分病人做动态观察,分别在治疗后1、3、6个月复查上述免疫指标,以探讨CD4+CD25+Treg与血液病的关系。对于AA和MDS,同时查外周血CD8+T细胞、CD4/CD8比值,以较全面地了解上述疾病的免疫状态。
结果:⑴正常对照组20例CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞分别占总淋巴细胞的74.12±6.15%、39.39±6.11%、34.73±7.82%、16.91±3.38%,CD4+CD25+/CD4+T细胞为0.43±0.07,CD4/CD8为1.21±0.4。⑵ITP患者治疗前CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+CD25+T细胞分别占总淋巴细胞的72.41±5.03%、33.53±9.7%、10.9±4.23%,CD4+CD25+/CD4+T细胞为0.34±0.12。其CD4+T细胞、CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+/CD4+T细胞均显著低于正常对照组,有统计学意义(P<0.05)。CD3阳性T细胞两组比较无统计学意义。治疗后1个月、3个月、6个月与治疗前比较CD4+T细胞、CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+/CD4+均明显升高,与治疗前相比差异有显著性(P<0.05),与正常对照比较均无显著差异(P>0.05)。治疗后病人按疗效分为显效及良效组、进步及无效组。前组的CD4+CD25+T细胞较后组高,但差异无显著性(P>0.05),2例治疗外周血象达完全缓解的患者,CD4+CD25+T细胞比例仍较低,分别于治疗第3、4个月时激素减量过程中复发。⑶治疗前AIHA患者外周血T细胞亚群分析, CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+CD25+T细胞分别占总淋巴细胞的72.6±2.18%、31.07±2.57%、10.28±1.92%,CD4+CD25+/CD4+T细胞为0.33±0.52。其CD4+T细胞、CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+/CD4+T细胞均显著低于正常对照组,有统计学意义(P<0.05)。CD3阳性T细胞两组比较无统计学意义。治疗1个月、3个月、6个月CD3+T细胞分别为73.15±2.73%、74.39±3.47%、73.27±3.41%,CD4+T细胞分别为36.73±2.58%、38.01±2.17%、38.12±1.66%,CD4+CD25+T细胞分别为15.95±2.55%、14.66±1.86%、15.51±3.45%,CD4+CD25+/CD4+分别为0.43±0.06、0.39±0.06、0.41±0.09。治疗后1个月、3个月、6个月与治疗前比较CD4+T细胞、CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+T细胞/CD4+T细胞均明显升高,差异有显著性(P<0.05),与正常对照比较均无显著差异(P>0.05)。治疗后病人按疗效分为完全缓解组、部分缓解与无效组。前组的CD4+CD25+T细胞较后组高,但差异无显著性(P>0.05)。⑷SAA患者CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞分别占总淋巴细胞的77.89±1.84%、32.85±5.57%、46.37±3.83%、26.6±5.92%,CD4+T细胞/CD8+T细胞为0.72±0.18,CD4+CD25+/CD4+T细胞为O.83±0.19;CAA患者CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞分别占总淋巴细胞的75.23±2.28%、38.7±4.08%、36.53±2.81%、18.74±3.98%,CD4+T细胞/CD8+T细胞为1.07±0.19, CD4+CD25+/CD4+T细胞为0.49±0.09;SAA患者CD3+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞、CD4+T细胞/CD8+T细胞、CD4+CD25+/CD4+T细胞的值较CAA组明显升高, CD4+T细胞减低,均具有显著差异(P<0.05)。SAA组与正常对照组比较, CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞、CD4+T细胞/CD8+T细胞、CD4+CD25+/CD4+T细胞的值较正常对照组明显升高, CD4+T细胞减低,具有显著差异(P<0.05),两者CD3+T细胞的值无显著差异。CAA组与正常对照组比较,CD3+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞高于正常对照组, CD4+T细胞低于正常对照组,但差异无显著性(P>0.05).SAA治疗1、3、6个月后,CD3+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞的比值较治疗前无明显变化。CAA治疗1、3、6个月后,CD3+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞、CD4+T细胞的比值较治疗前减低,CD4+T细胞较前升高,与正常对照组接近。⑸RA/RAS组CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞分别占总淋巴细胞的75.92±1.76%、38.85±4.21%、37.07±3.72%、20.94±3.83%,CD4+T细胞/CD8+T细胞为1.07±0.22, CD4+CD25+/CD4+T细胞为0.55±0.12;RAEB/RAEB-t患者CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞分别占总淋巴细胞的77.49±2.07%、34.1±5.5%、43.4±5.08%、25.7±5.8%,CD4+T细胞/CD8+T细胞为O.81±0.22, CD4+CD25+/CD4+T细胞为0.78±0.21;两组治疗前比较,RAEB/RAEB-t组CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+/CD4+T细胞的值较RA/RAS组明显升高,CD4+T细胞、CD4+T细胞/CD8+T细胞减低,差异有显著性(P<0.05)。两组CD3+T细胞无显著差异。RA/RAS组治疗前与正常对照组比较, CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+/CD4+T细胞的比值较正常对照组高,有统计差异(P<0.05).CD8+T细胞、CD3+T细胞较正常对照组高,但差异无显著性(P>0.05).RAEB/RAEB-t组治疗前与正常对照比较,RAEB/RAEB-t组CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+/CD4+T细胞的值较正常对照组明显升高,CD4+T细胞、CD4+T细胞/CD8+T细胞明显减低,差异有显著性(P<0.05),两组CD3+T细胞无显著差异。RA/RAS组治疗后,CD4+CD25+T细胞减低,治疗6个月后与正常对照组比较无显著差异(P>0.05).RAEB/RAEB-t治疗后,各项免疫指标无显著改变,治疗6个月后CD4+CD25+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+/CD4+T细胞仍较正常对照组高,CD4+T细胞仍明显减低,差异有显著性(p<0.05)。
结论:①ITP、AIHA患者治疗前CD4+CD25+Treg细胞显著低于正常对照组,治疗后明显升高。CD4+CD25+Treg细胞可能参与ITP和AIHA的发生,有着密切联系。②AA是一组异质性的疾病。SAA患者CD8+、CD4+CD25+Treg细胞占淋巴细胞百分比显著高于CAA组及正常对照组,CD4/CD8明显低于CAA组及对照组,普通免疫抑制剂治疗后上述免疫指标无明显变化。而CAA组治疗前上述免疫指标改变与正常对照组比较差异无显著性。显示SAA较CAA免疫异常在其发病中所起的作用更为显著,更需要强化免疫抑制治疗。③MDS的RAEB/RAEB-t阶段负性造血调节分子CD4+CD25+T细胞较RA/RAS阶段增高, CD4+T细胞占外周血淋巴细胞比例减低,CD8+T细胞占外周血淋巴细胞比例增高,显示RAEB/RAEB-t比RA/RAS具有更明显的免疫异常。